客户服务
 关 键 字:
 产品类别:
  多肽及试剂盒
  2020年产品目录
实验室分类
      临床检验实验室  
      生化实验室  
      酶标实验室  
      血流变实验室  
      病理实验室  
      特种蛋白实验室  
      免疫印迹实验室  
      流式细胞实验室  
      PCR实验室  
      放免实验室  
      化学发光实验室  
      微生物实验室  
      标本准备实验室  
激素蛋白类放免产品
      甲状腺类  
      肿瘤类  
      生殖、生理、性激素  
      心血管、糖尿病类  
      血液病、肾病及细胞因  
      脑肠肽类  
      固相包被类  
      其他诊断试剂  
      肝纤化类  
      特种蛋白类诊断试剂  
      骨代谢类诊断试剂  
酶标产品类
      细胞因子诊断试剂  
      肝炎类定性产品  
      优生优育类  
      肿瘤系列  
      甲状腺系列  
      多肽及其它  
      其他诊断试剂  
多肽、一抗、二抗
      多肽  
      一抗  
      二抗  
免疫组化试剂盒
      免疫组织化学常用试剂  
      免疫印迹常用试剂  
      免疫组化标本前处理试  
ELISA试剂盒
      甲状腺类  
      肿瘤类  
      生殖、生理、性激素类  
      心血管、糖尿病类  
      肝纤化类  
      血液类  
      肾病类  
      细胞因子类  
      特种蛋白类  
      骨代谢类  
      脑肠肽、神经肽类  
      其他诊断试剂  
实验与交流
华英实验中心
      华英实验中心  
包装与运输
其它诊断试剂
      化学发光免疫分析试剂  
      化学发光检测试剂盒  
      血细胞分析仪试剂  
      细胞凋亡检测试剂盒  
      细胞因子  
      生化试剂  
      金标快速检测试剂  
抗凝剂
 
您的位置:首页 >> 新闻动态
免疫组化的注意事项及好的免疫组化片子的判断标准

 一、标本的留取及保存
a、标本新鲜:一般在2h以内进行,超过2h,组织将有不同程度的自溶,其抗原或变性消失,或严重弥散。
b、取材部位:除取病灶或含待检抗原部位外,还应取病灶与正常交界处,即所取组织切片中同时应有抗原阳性和阴性区,以形成自身对照。细胞坏死后,不仅抗原弥散或消失,而且常引起非特异着色,干扰观察,因此取材时应尽可能避开坏死区。
c、取材时避免挤压,应使用锋利的刀刃,镊取组织动作要轻。
d、取材后的组织需立刻投于固定剂中(常用福尔马林或4%多聚甲醛)
二、免疫组化实验步骤
1,切片,烤片60℃,1h;
2,脱蜡及复水
二甲苯10min,100%乙醇5min,95%乙醇5min,90%乙醇5min,85%乙醇5min,80%乙醇5min, 75%乙醇5min,60%乙醇5min,50%乙醇5min,30%乙醇5min,自来水1min,双氧水1min;
3,1份30%H2O2加10份蒸馏水,室温10min,蒸馏水洗3次,每次3min;
4,微波修复
将切片浸入0.01M枸橼酸缓冲液,微波中****火力(98℃-100℃)加热至沸腾,冷却(约5-10min),反复两次;
5,将切片自然冷却至室温,PBS洗涤3次,每次5min;
6,封闭,5%BSA,室温20min,甩去多余液体;
7,滴加一抗,37℃,1h,或者4℃过夜;
8,PBS洗涤3次,每次3min;
9,滴加二抗,37℃,15-30min;
10,PBS洗涤3次,每次3min;
11,滴加SABC,37℃, 30min;
12,PBS洗涤3次,每次5min;
13,1ml蒸馏水中分别滴加显色剂,混匀;
14,DAB显色剂配置好后,滴加于切片,室温,镜下检测反应时间(约5min);
15,自来水冲洗干净,过蒸馏水;
16,苏木素复染2min,自来水冲洗;
17,脱水
30%乙醇3min,50%乙醇3min,70%乙醇3min,80%乙醇3min,90%乙醇3min,95%乙醇3min,100%乙醇3min,二甲苯20min;
18,树胶封片,镜检。
三、免疫组化切片保存
采用蜡封固切片和-20度低温保存组织切片来避免抗原损失,或石蜡组织块4度保存
四、优质染色切片的标准
1、图像清晰
2、背景染色浅而特异性染色较深
3、阳性与阴性对照明显。
以下是优质切片范例:

                         

                  

               

 
北京华英生物技术研究所 版权所有
免费电话:8008109828 邮编:100036 北京华英生物技术研究所 电话:(010)56146198 (010)88114651 传真:(010)88112680
QQ客服:1749417768 客户服务 网 址:北京华英生物技术研究所 www.sinoukbio.com   E-Mail: sinouk@163.com 
京ICP备09006766号