科研药盒,慎用于临床
谷氨酰胺试剂盒说明书
GLN(HY-60057)KIT
一、测定意义:
谷氨酰胺Glutamine GLN是非必须氨基酸,机体许多组织含有GLN合成酶,此酶能合成GLN,但在剧烈运动、创伤、感染等应急和高分解状态下,机体对GLN的需要量大大超过了机体合成GLN的能力。机体合成的GLN量不足,导致蛋白质合成减少,小肠粘膜萎缩等现象,因而GLN被称为条件必须氨基酸。
二、测试原理
谷氨酰胺-谷氨酰胺合成酶------谷氨酸+NH3
通过测定NH3来计算谷氨酰胺的量
三、试剂组成及配制:(50T)
1.试剂一:液体1.6ml×1支,室温保存。
2.试剂二:粉剂×2支,-20℃冷冻保存;稀释液5ml×1支,4℃保存。
试剂二储备液的配制:用时取一支粉剂加稀释液0.2ml,混匀,用不完的-20℃保存五天。
试剂二应用液的配制:试剂二储备液:稀释液=1:1,用不完的-20℃保存24小时。
3.试剂三:60ml液体×1瓶。室温避光保存。
4.试剂四:60ml液体×1瓶。室温避光保存。
5.试剂五:谷氨酰胺标准品粉剂×3支,稀释液30ml×1支,4℃保存。100mmol/L谷氨酰胺标准品储备液的配制:将1支粉剂加1ml稀释液溶解混匀。4℃保存。
2mmol/L谷氨酰胺标准品应用液的配制:取谷氨酰胺标准品储备液按1:49加稀释液进行50倍稀释。如:取0.04ml标准品储备液加稀释液稀释至2ml,混匀,待测。
四.操作步骤:
谷氨酰胺操作步骤 单位(ul) ————————————————————————————————————— 空白管 标准管 测定管 ————————————————————————————————————— 蒸馏水 10 -- -- 2mmol/L谷氨酰胺标准品应用液ml -- 10 -- 样本 -- -- 10 试剂一 30 30 30 试剂二应用液 10 10 10 ————————————————————————————————————— 混匀,37℃水浴15分钟。 ————————————————————————————————————— 试剂三 1000 1000 1000 试剂四 1000 1000 1000 —————————————————————————————————————
混匀,37℃水浴15分钟,取出于630nm处,1cm光径,蒸馏水调零,测各管OD值。
五.计算公式:
1.血清(浆)中谷氨酰胺的计算:
谷氨酰胺(mmol/L=(测定管OD值-空白管OD值)/(标准管OD值-空白管OD值)×标准浓度(2mmol/L)×样本测定前稀释倍数
1. 组织中谷氨酰胺的计算:
谷氨酰胺浓度(mmol/gprot)*=(测定管OD值-空白管OD值)/(标准管OD值-空白管OD值)×标准浓度(2mmol/L×样本测定前稀释倍数÷蛋白含量(gprot/L)**
*mmol/gprot=毫摩尔/克蛋白
**gprot/L=克蛋白/升
六、注意事项: 1. 样品测定值超过上限,用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。 2. 本法以定值血清为标准,准确性高。 3. 本产品仅用于体外诊断,内含叠氮钠,应避免直接接触皮 肤和眼睛,切勿吞咽。 4. 本产品应在2~8℃避光贮存,避免在2~8℃以上及0℃以下存放。
本试剂盒主要技术指标: 线性范围:0-60umol/L 精密度:批内变异系数:CVw<7.3%; 批间变异系数:CVw < 10% 。 灵敏度:<5nmol/ml
生产日期: 有效日期: 生产批号: 地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业园东区1号楼12层12A 北京华英生物技术研究所 邮编:100036 电话:010-88114651 传真:010-88112680 免费电话:8008109828
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