胃蛋白酶可水解蛋白产生含酚的氨基酸，而酚试剂可被含酚的氨基酸还原成蓝色物质，通过比色可测定胃蛋白酶活力。

1.     试剂一：液体24ml×1瓶，4℃条件下可稳定保存90天。

2.     试剂二：液体6ml×2瓶，4℃条件下可稳定保存30天。

3.     试剂三：液体100ml×1瓶，4℃条件下可稳定保存90天。

4.     试剂四：液体9ml×2瓶，避光4℃条件下可稳定保存60天。

5.     试剂五：1mg/ml标准品储备液1ml×1瓶，标准品稀释液20ml×1瓶，4℃条件下可稳定保存30天。

50ug/ml标准应用液的配制：取1mg/ml标准品储备液50ul用标准品稀释液稀释至1ml，即1:9(体积比)稀释，充分混匀后，4℃条件下可稳定保存至少10天。

6.     试剂六：匀浆介质60ml×2瓶，4℃条件下可稳定保存30天。

1.     样本前处理：

（1）       胃液：先做预试，再根据活力大小或直接取胃液进行检测或用匀浆介质进行适当稀释后再测。

（2）       组织：准确称取组织重量（不要超过0.2g），按重量体积比加9倍体积的匀浆介质匀浆，2500转/分离心10分钟，取上清即10%的匀浆，进行预试后根据活力大小或直接进行检测或用匀浆介质进行适当稀释后再测。

2.     样本及试剂在测试前均要平衡至室温（室温在20℃以上可放置室温；室温在20℃以下可将试剂置于37℃水浴中预温10分钟）

3.     操作表：

                                    胃蛋白酶操作步骤            单位（ul)

                                     37℃水浴预温2分钟

                                充分混匀，37℃准确水浴10分钟

   充分混匀，37℃水浴10分钟，3500转/分离心10分钟， 取上清进行显色反应。

充分混匀，37℃水浴20分钟后 取出，660nm，1光径，蒸馏水调零，比色。

注：*测定空白管因不同的样本之间有差距，所以要求每只样本都要做自身测定空白管；而标准及标准空白管只需各做1-2只。

1.     胃液中胃蛋白酶活力的计算：

公式:胃蛋白酶活力（U）=（测定管OD值-测定空白管OD值）/(标准管OD值-标准空白管OD值)×标准品浓度（50ug/ml）÷反应时间10min×稀释倍数*

注：*稀释倍数=反应总体积0.64ml/取样量0.04ml×样本测试前稀释倍数

 

2.     组织中胃蛋白酶活力计算：

公式：组织中胃蛋白酶活力（U）=（测定管OD值-测定空白管OD值）/(标准管OD值-标准空白管OD值)×标准品浓度（50ug/ml）÷反应时间10min×稀释倍数*÷匀浆蛋白含量（mgprot/ml）

注：*稀释倍数=反应总体积0.64ml/取样量0.04ml×样本测试前稀释倍数

注意事项：
1. 样品测定值超过上限，用生理盐水稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数。
2. 本法以定值血清为标准，准确性高。
3. 本产品仅用于体外诊断，内含叠氮钠，应避免直接接触皮   肤和眼睛，切勿吞咽。
4. 本产品应在2~8℃避光贮存，避免在2~8℃以上及0℃以下存放。
本试剂盒主要技术指标：
1、线性范围：0-18U/ml
2、精密度：批内变异系数：CVw<8.3%；
      批间变异系数：CVw < 9%
3、灵敏度：<1.2U/ml

生产日期：2013-03-15
有效日期：2013-9-15
生产批号：20130315
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