本试剂适用于体外检测人血清或尿液中N-乙酰-β-D-氨基葡糖糖苷酶

的活性。

NAG是一种细胞内溶酶体酶（EC3.2.1.30）,以肾近曲小管含量最高。尿、血清NAG活性变化与机体某些病理状态密切相关，主要临床应用和意义如下：

1.     肾小球肾炎：急性期尿NAG活性可高于正常值10倍，病程消退时，NAG活性下降或恢复正常，其动态变化与疾病转归一致。

2.     急性肾功能衰竭：在尿量减少而血肌酐和尿素氮改变不大时，尿NAG已极显著升高。

3.     肾病综合症：尿NAG可显著=增高，严重者可超过正常值10-20倍，缓解期NAG下降，是比尿蛋白、血清肌酐、尿素氮更灵敏的临床检测指标。

4.     药物肾毒性的监测和早期发现:常见于氨基类和头孢类抗癌药物、免疫抑制剂、非甾类抗炎物质、镇痛剂等有肾毒性的药物对肾损伤的发现和损伤程度的检测。

5.     肾移植后排异反应监测：在肾移植后，急性排异前，尿NAG活性显著升高，变化早于血尿、蛋白尿等指标。

6.     应用于重金属肾损伤监测、肾毒物质环境污染人群筛查、儿童尿普查发现隐形肾炎。

（二）  血清NAG：

肝硬化、慢性肝的血清NAG活性升高。中、晚期妊血清NAG活性升高。

本试剂用速率法则测定血清或尿中NAG的活性。样品中的NAG作用于底物2-氯-4-硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡糖糖苷(CNP-NAG)，水解游离出CNP，其生成速度与样品中酶活性在一定范围内成正比，可在400-405nm测定每分钟吸光度的变化（△A/分），计算NAG的活性。

单位定义:

1升尿液（或血清）中NAG在37℃水解底物CNP-NAG，1分钟生成1umol的CNP，为1单位/升（U/L）

1.CNP-NAG干粉   10×7.5mg

2.缓冲液         50umol/L

干粉

试剂干粉储存可稳定一年，复溶后冰冻可保存30天.

本试剂用新鲜血清，-20℃可存放一个月；尿标本可取用新鲜尿液或4℃保存不超过一周的尿。

具有能在波长405nm处测定的生化析仪。

方式   动力法       样品量        20ul

温度   37℃         试剂量        400ul

波长   405nm        延迟时间     30秒

光径    1cm         测定时间     30秒

F值    2415         反应时间    正反应

底物工作液的配制：取10ml缓冲液加入一瓶干粉底物中,可根据需要分装于试管中并加塞防止水份蒸发，冰冻可保存30天，每次用时根据需要取出合适量融化即可，如4℃存放可保存2天。

工作液预先保温至37℃.

                                  NAG 操作步骤                     单位（ul)

标本NAG活性（U/L）=△A/分×F    F=2415

F=Vt/Vs×103/(s×d)

Vt=反应液总体积（ul）

Vs=样本体积(ul)

d=比色杯光径

s=CNP在本实验条件下的毫摩尔消光系数，本实验中为8.696

0-800U/L

1.              尿肌酐测定：单位g/l，用同一份尿标本1：51比例稀释后测定。结果乘以稀释倍数，单位换算：1g/l（肌酐）=8840umol/L（肌酐）.

2.              结果表示：尿NAG活性用U/g.CRE表示，血清NAG活性用U/L表示。

3.              血清NAG活性测定，方法与测定尿标本相同。

4.              本说明书中F值适用于光径为1cm的比色杯，若光径不为1cm，则F=2415/d，d为比色杯光径。

5.              本试剂盒试剂空白速率稳定，每个试剂盒可做一次空白，若试剂空白吸光度大于0.3，说明试剂失效。请勿使用。

6.              可根据仪器要求，按比例改变标本、试剂量。

7.              本试剂中含有叠氮钠，请勿吸入并避免与皮肤、粘膜接触。

8.              实验废液因含有血清，须先进行消毒处理，再用大量水冲洗排放。

血清   5-38U/L

尿   0.75-23.9U/g.CRE

建议各实验室建立自己的正常参考范围。

1.     Makise J.et al.【J】.Clin Chem.1988；34：2140

2.     Hideto S,Tatsuhiko Y .[J].Clin Chim Acta；1996；251：53.