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骨桥蛋白放免药盒操作说明书
                ONPHY-061 RIA   KIT
 
  骨桥蛋白(Osteopontin OPN)是一种分泌磷酸化糖蛋白。也是一种促炎因子,其生物学功能:免疫调节、信号转导、伤口愈合、组织修复、骨的血吸收、动脉粥样硬化的形成。肾脏疾病和肿瘤的发生。
标本收集:空腹抽静脉血4ml于特凝管中(含有10%EDTA . Na2 30ul和抑肽酶40ul),实验前标本需过 C18柱。
 
该药盒主要应用范围:
  * 免疫学功能基础的研究。
  * 组织及骨代谢的研究。
  * 肿瘤、肾脏等疾病的研究。
* 与其他激素关系的研究。
    药盒组成:
1.  OPN标记一瓶;       2 OPN抗体一瓶;
3. OPN标准品5瓶,分别为20、50、100、200、400、800pg/ml。
4. 缓冲液一瓶;        5.分离剂(第二抗体)一瓶。
 
    操作方法:
                        OPN   RIA  操作程序             (单位:ng/ml)
             ————————————————————————————
               试   剂      T     NSB      S0     标准品    标  本
             ————————————————————————————
               缓 冲 液    ——    200     100     ——      ——
               标 准 品    ——    ——    ——    100       ——
               标    本    ——    ——    ——    ——      100
               抗    体    ——    ——    100     100       100
             ————————————————————————————
                       充分混匀,放4℃  24小时
             ———————————————————————————— 
               125I- OPN    100     100     100     100       100
            ————————————————————————————                   
                        充分混匀,4℃  24小时
            ————————————————————————————
               分 离 剂     ——    500     500    500       500
            ————————————————————————————
混匀,室温放置1.5小时后,3500转/分 离心 20分,去上清,测沉淀CPM值。
 
 
 
 
 
 
 
 
 结果计算:
        以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,在半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
 注意事项:
     本月每瓶标准品用   1.4          ml缓冲液稀释;
     本月每瓶抗体用     10          ml缓冲液稀释;
     本月每瓶标记用     10          ml缓冲液稀释。  
本试剂盒主要技术参数:
       NSB:<5%。      
       灵敏度:<25pg/ml。
       精密度:批内CV<7.7%,批间C
   正常参考数据:50~100ng/ml
该说明书由英国皇家医学院内分泌部《OPN药盒操作说明书》翻译而来。
Department of  Endocrinology  Royal  Postgraduate  Medical  School
   本次药盒参考数据:    
             ——————————————————————————————
                    T     NSB     S0           S1     S2   S   S4    S5     
             ——————————————————————————————
              CPM
             ——————————————————————————————
                      N/T%      B0/T%      B/ B0 %
             ——————————————————————————————   
生产日期:2010-04-03
        有效日期:2010-05-03
        生产批号:20100403
  
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