甲状腺素放免试剂盒操作说明书
甲状腺素（T4）又名一四碘甲状腺原氨酸，分子量为777。T4是甲状腺分泌的主要甲状腺激素之一，T4从甲状腺分泌到血循环后99.5%与甲状腺素结合球蛋白（TBG）、甲状腺素结合前蛋白和白蛋白等结合，其作用使激素防止由肾脏排出体外。T4与三种蛋白质结合的百分率，分别为70%、20%、10%，在血循环中只有0.05%的T4为游离状态（FT4）。T4可以经脱碘酶的作用形成生物活性更强的三碘甲状腺原氨酸（T3）。T4主要功能为调节蛋白质及脂肪的代谢，促进生长发育等。血循环中T4的水平受丘脑—垂体—甲状腺轴系统负反馈机制所调节。由于T4绝大部分与TBG等结合，血中总T4水平必然受血中TBG的影响。为了纠正TBG的影响，联合125I-T3的摄取率测定，计算游离T4指数，将获得有意义的结果。甲状腺疾病是内分泌系统常见的疾病，总T4放射免疫测定是研究甲状腺功能最有效最常用的方法之一。
药盒组成：
1、 T4标记（红色）1瓶 。
2、 T4 抗体1（蓝色）瓶。
3、 分离剂（第二抗体）一瓶。
4、 T4标准品6瓶。其浓度分别为：0、20、40、80、160、320ng/ml(即:0、25.74、51.48、102.96、205.92、411.84)。
以上各组试剂均应摇匀使用。
操作方法：
1、样品处理：取晨空腹静脉采血，分离血清。（2－8）℃放置可保存7天，若冰冻保存，可放置四周。脂血或溶血样品影响测定结果。
2、 实验方法：试管编号，按下表程序操作：
操作表 （ 单位: ul）
|
管 别 |
标准管 |
样品 |
抗血清 |
蒸馏水 |
125I-T4 |
混匀，37℃温育1小时，任取三管测总T（CPM） |
分离剂 |
|
NSB管 |
50（S0） |
-- |
-- |
100 |
200 |
500 |
|
S0管 |
50 |
-- |
100 |
-- |
200 |
500 |
|
S1-S末管 |
50 |
-- |
100 |
-- |
200 |
500 |
|
样品管 |
-- |
50 |
100 |
-- |
200 |
500 |
混匀，室温放置15分钟，离心（3500转/分）15分钟，吸弃上清液，测定各管沉淀的放射性计数（CPM）。
数据处理：
1、计算机处理：建议函数模型采用三次多项式或log～logit法。
2、计算、绘图法：
计算各管的百分结合率：以S0（cpm数）为B0，各标准管Si（cpm数）为Bi，求各管的百分结合率。
(1）线性回归：用logX～logitY回归，求出r、a、b值，样品含量可由下式计算得出。
(2）绘图法：用各标准点计算的结果，在半对数坐标纸上绘制Bi/B0~logX标准曲线图或在log～logit坐标纸上绘制标准曲线图，未知样品浓度可根据Bi/B0的百分结合率从标准曲线图上查出。
正常叁考值：
各实验室应建立自己的正常值，下列正常参考值仅供参考：
T4（n=150）：50～126 ng/mL (64.30~162 .2nmol / L)
技术特性：
1、曲线范围：（20～320）ng/Ml (25.74~411.84nmol / L)
2、灵敏度： < 3ng/mL(3.86nmol / L)
3、特异性：T4抗血清与T3的交叉反应合格。
4、精密度：批内CVw<10%，批间CVb<15%
5、单位换算：（nmol/L）=(ng/Ml)×1.287
保存及有效期：
药盒于（2～8）℃避光保存，切勿冻存。自检定合格之日起有效期为45天。
药盒参考数据：
|
指标 |
B/T（%） |
Bi/B0(%) |
|
项目 |
NSB |
S0 |
S1 |
S末 |
|
参数 |
<5 |
≥55 |
80 |
15 |
生产日期：
有效日期：
地址：北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业园东区1号楼12层12A
北京华英生物技术研究所
免费电话：8008109828
邮 编： 100085
电 话：（010）88114651 (010) 56146198
传 真：（010）88112680
网址：www.sinoukbio.com
E-Mail:sinouk@163.com
QQ客服：1749417768
|
