6-酮-前列腺素F1a放免药盒说明书
6-Keto-PGF1a （HY-10049）RIA Kit
前列环素（PGI2）是由血管壁内皮细胞合成和释放的一种抗血小板聚集和舒张血管的生物活性物质，生物半衰期约3分钟，迅速代谢生成6-酮-前列腺素F1a（6-Keto-PGF1a）。在正常生理状态下血浆或组织中TXA2和PGI2的浓度比例处于相对平衡，以保持机体内环境的稳定。由于某些病理因素引起TXA2和PGI2平衡失调是造成血小板聚集，血管痉挛收缩或血栓形成的原因之一。因此，测定这两种化合物在血、组织及其它体液中的浓度在基础医药理论研究、临床血栓形成的发病预测、疗效判断具有十分重要的意义。
由于TXA2和PGI2的不稳定性，目前难以直接测定，故国内外均以测定TXB2和6-Keto-PGF1a作为判断其浓度的指标。本试剂盒操作程序十分简便，灵敏度高，重复性好，血浆或其它样品不经提取直接测定，特别适合大量样品的测定。
药盒组成及配制：（常温运输，4℃保存）
1、 缓冲液 1 瓶。
2、 抗体 1瓶，50T加缓冲液 5. 5 ml溶解；100T加缓冲液 10. 5 ml溶解。
3、 125I - 6-Keto-PGF1a 1瓶：用前每瓶加缓冲液 5. 5 ml溶解。
4、 标准品1支（1.6ng/瓶）。
用前加缓冲液 1 ml，浓度1600pg/ml作为S7，另取试管6支，编号S6~S1各加缓冲液
0. 5 ml，由S7中取0. 5ml加到S6，依次倍比稀释至S1， 浓度为25、50、100、200、
400、800、1600pg/ml。
5、 PR分离剂（第二抗体）1瓶。
样品收集：
1、血浆：取一次性5ml空针吸取消炎痛-EDTA·Na2约0.1ml，快速静脉穿刺取血5ml，
即刻在空针内颠倒混匀，注入试管内，4℃ 3500rpm / min离心15min ，分
离血浆，放-20℃保存。
2、组织：取新鲜活组织即刻置液氮中保存。或快速称取一定重量（依组织不同可称
取5~20mg）置微型匀浆器中，加无水乙醇 0.1ml 研磨，再加生理盐水0.9ml
充分研磨制成匀浆，放-20℃保存。测定前4℃ 离心（3500rpm/ min，15min）
取上清。
3、尿液：尿液收集12小时，晚7时排尿弃去，向容器内加冰醋酸或甲苯4ml防腐，
至次日7时留取胜12小时内尿液收集至瓶中，混匀，量总 ml 数，留 5ml
放-20℃以下保存。测定前调至pH 7.0。
测定方法：
本实验采用非平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：（加样单位： ul ）
6-Keto-PGF1a RIA KIT （单位：ul）
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试 剂 T NSB S0 S1~S7 样 品
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缓冲液 —— 300 200 —— ——
标 准 液 —— —— —— 200 ——
样 品 液 —— —— —— —— 200
抗 体 —— —— 100 100 100
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混匀，放37℃ 5~6小时
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125I- 6-Keto-PGF1a 100 100 100 100 100
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混匀4℃ 过夜
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PR试剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温放置15分钟后，3500转/分 4℃ 离心15 分钟，弃上清液，测定沉淀cpm数。
注：测定兔血清时，应改用25%PEG 做分离剂 每管500ul，NSB、S0~S7管补加Υ球蛋白血
清100ul/管，样品管补加B缓冲液 100ul/管。
结果计算：1、以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值，或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数、标准曲线及样品浓度。2、组织样品得出样品浓度后，再根据称取组织量，计算出每mg组织中的量。3、尿液样品从每ml浓度再计算每小时或每分钟排出量。
本试剂盒主要技术指标：
NSB<5%；灵敏度：<25pg/ml； 标准曲线范围：25~1600pg/ml；
精密度：批内CV<3.5 %, 批间CV < 10% ；
特异性：本试剂盒对其它花生四烯酸代谢产物交叉反应<0.1 %；
正常参考值： 89.63±22.60pg/ml(n=25)。
本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7
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CPM
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N/T% 2.3 B0/T% 40 B/ B0 % 73 64 42 35 23 17 8
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生产日期：2007-4-25
有效日期：2007-5-31
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