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前列腺素E2放射免疫分析试剂盒使用说明
                                                 PGE2 (HY-10047)  RIA     KIT
 
      PGE2是体内多种细胞花生四烯酸代谢产物之一,对维持细胞与组织的营养、生长及功能有重要作用,特别是在泌尿生殖系统、呼吸系统、消化系统与神经系统中PGE2有重要的生理病理意义,为研究多种疾病的病理变化、观察临床经过及转归提供了一个新的手段。
一、原理
抗前列腺素E2(PGE2)抗体与PGE2发生特异性结合反应,形成抗原抗体复合物。在抗体不足的情况下,一定量的放射标记抗原即可推算待测样品中相应PGE2的含量。
二、药盒组成:
1、PGE2标准品160pg/ 0.1ml一瓶:测定时加入缓冲液倍比稀释成1.25pg/0.1ml
~80pg/0.1ml ,七个管。(PGE2  st)
2、PGE2标记物一瓶,测定时加入缓冲液10ml稀释。       
3、PGE2抗体一瓶,测定时加入缓冲液9ml稀释。   
4、γ—球蛋白一瓶,测定时加缓冲液21ml.
5、聚乙二醇—4000(壹袋)称重后用缓冲液配成25%浓度。         
6、PGE2缓冲液一瓶,加蒸馏水至300ml。
三、实验步骤:
                          PGE2  RIA加液程序    (单位: ul )
             ————————————————————————————
               试   剂      T     NSB     S0      S1~S5    样  品
             ————————————————————————————
               缓 冲 液    ——    300     300     200      300
              γ—球蛋白   ——    400     400     300      200
               标 准 品    ——    ——    ——      100      ——
               样       品    ——    ——    ——    ——       100
             125I- PGE2   100   100     100     100      100
                抗      体    ——    ——     100     100      100                         
              ————————————————————————————
                 混匀,4℃过夜(或37℃ 2小时,再置4℃半小时)
             ————————————————————————————
               25%PEG     ——    700     700    700      700
             ————————————————————————————
       混匀,室温放置15分钟后,3000 转/分 离心30分钟,去上清,测定沉淀cpm值。
 
四:计算
    以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,在半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。(此为0.1ml中PGE2的含量,换算成每1ml的含量需乘以10)。
 
五:注意事项:
1、试剂盒所有试剂于4℃保存。
2、如测定标本为血桨,抗凝剂为2%EDTA—Na2(含0.7NaC1),(若需可以提供)。取血的注射器与试管均用塑料试管,一次性塑料注射器,抗凝剂与血量为1:9。
3、本试剂盒适用组织及血液的测定。
4、如测定标本为活化后血小板的上清液,标本测定TXB2以前要稀释(稀释倍数取决用的血小板活化剂的种类)。
5、尿及其他液的测定:尿液需留24h尿,加入6N HCL1:9防腐。
6、组织测定:组织取下后,放入生理盐水中冲洗,吸干,制成匀浆,加入生理盐水,混匀,37F保温15分钟,离心取上清。
7、标本置于低温冰箱的有效保存期为6个月。
8、正常人血浆参考值:35.9±12pg/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对
照组。
本月药盒参考数据:
        ——————————————————————————————————————
               T     NSB      S0           S1    S2     S3       S  S5    S6    S7
         ——————————————————————————————————————
         CPM
         ——————————————————————————————————————
                N/T%        B0/T%        B/ B0 %  
         ——————————————————————————————————————
    
         
         
      生产日期:2007-6-30
      有效日期:2007-7-30
 
 
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