前列腺素E2放射免疫分析试剂盒使用说明
PGE2 (HY-10047) RIA KIT
PGE2是体内多种细胞花生四烯酸代谢产物之一,对维持细胞与组织的营养、生长及功能有重要作用,特别是在泌尿生殖系统、呼吸系统、消化系统与神经系统中PGE2有重要的生理病理意义,为研究多种疾病的病理变化、观察临床经过及转归提供了一个新的手段。
一、原理:
抗前列腺素E2(PGE2)抗体与PGE2发生特异性结合反应,形成抗原抗体复合物。在抗体不足的情况下,一定量的放射标记抗原即可推算待测样品中相应PGE2的含量。
二、药盒组成:
1、PGE2标准品160pg/ 0.1ml一瓶:测定时加入缓冲液倍比稀释成1.25pg/0.1ml
~80pg/0.1ml ,七个管。(PGE2 st)
2、PGE2标记物一瓶,测定时加入缓冲液10ml稀释。
3、PGE2抗体一瓶,测定时加入缓冲液9ml稀释。
4、γ—球蛋白一瓶,测定时加缓冲液21ml.
5、聚乙二醇—4000(壹袋)称重后用缓冲液配成25%浓度。
6、PGE2缓冲液一瓶,加蒸馏水至300ml。
三、实验步骤:
PGE2 RIA加液程序 (单位: ul )
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 300 300 200 300
γ—球蛋白 —— 400 400 300 200
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
125I- PGE2 100 100 100 100 100
抗 体 —— —— 100 100 100
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混匀,4℃过夜(或37℃ 2小时,再置4℃半小时)
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25%PEG —— 700 700 700 700
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混匀,室温放置15分钟后,3000 转/分 离心30分钟,去上清,测定沉淀cpm值。
四:计算
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,在半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。(此为0.1ml中PGE2的含量,换算成每1ml的含量需乘以10)。
五:注意事项:
1、试剂盒所有试剂于4℃保存。
2、如测定标本为血桨,抗凝剂为2%EDTA—Na2(含0.7NaC1),(若需可以提供)。取血的注射器与试管均用塑料试管,一次性塑料注射器,抗凝剂与血量为1:9。
3、本试剂盒适用组织及血液的测定。
4、如测定标本为活化后血小板的上清液,标本测定TXB2以前要稀释(稀释倍数取决用的血小板活化剂的种类)。
5、尿及其他液的测定:尿液需留24h尿,加入6N HCL1:9防腐。
6、组织测定:组织取下后,放入生理盐水中冲洗,吸干,制成匀浆,加入生理盐水,混匀,37F保温15分钟,离心取上清。
7、标本置于低温冰箱的有效保存期为6个月。
8、正常人血浆参考值:35.9±12pg/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对
照组。
本月药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期:2007-6-30
有效日期:2007-7-30
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