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尿钠素放免药盒操作说明书
URO HY-10051 RIA  Kit
   
     尿钠素(URO dilatin  URO)是Forssmanm等人1988年从人尿中分离出的一种含有32个氨基酸的多肽。URO是一重要的促尿钠排泄生物活性肽,在机体正常生理或病理状态时发挥重要的作用,与临床某些疾病的发生、发展关系密切,尤其是在处理心脏、肝脏移植后抗急性肾功能衰竭方面有重要意义,但其作用机制尚不完全清楚,因此深入开展这方面的研究,对基础研究和临床医学具有非常现实的意义。
测定盒的组成:
1、   缓冲液二瓶。
2、   URO标记一瓶。
3、   URO抗体一瓶。
4、   URO标准品五瓶:0.3、0.9、2.7、8.1、16.2ng/ml。
5、   分离剂(第二抗体)一瓶。
    样品收集:
   1、收集12小时尿液,记录总量,留取3~4 ml(必要时分成1ml/管)放-20℃冰箱
      备用。
   2、留随意尿10 ml,计算两次尿间隔时间及尿量。
   3、尿标本处理:取尿标本1 ml加无水乙醇1.5ml (也可取尿标本0.5ml加无水乙
醇0.75~1ml)震混1分钟,3500转/分离心15分钟,将上清倒入青霉素瓶中,在45℃
水浴锅上蒸干(可将水浴锅温度调至80℃左右,锅口上放一铝板,铝板温度约40-45
℃,青霉素瓶置于铝板之上)大约48小时以上样品可完全干燥,干燥后将青霉素瓶加
盖,封口放-20℃保存。测定前,每瓶加PH7.4缓冲液1 ml溶解(如用0.5ml尿液提取,
加缓冲液0.5ml溶解)混匀后取上清200ul测定用。
    测定方法:
                        URO    RIA  操作程序       (单位:ul)
             ————————————————————————————
               试   剂      T     NSB     S0     S1~S5     样  品
             ————————————————————————————
               缓 冲 液    ——    300     200    ——      ——
               标 准 品    ——    ——    ——    200      ——
               样    品    ——    ——    ——    ——      200
               抗    体    ——    ——    100     100       100
            ————————————————————————————
                              摇匀4℃ 放置48小时
            ————————————————————————————
              125I- URO     100      100     100     100       100
            ————————————————————————————                   
                            摇匀4℃ 放置24小时
            ————————————————————————————
               分 离 剂     ——     500     500    500     500
            ————————————————————————————
            混匀,3500 转/分 离心15分钟,去上清,测定沉淀cpm值。
 
 
    结果计算:
    以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,在半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。由每ml尿液中含量乘以尿量,再除时间,换算成每小时或每分钟排出量。
 
    注意事项:
    本月标准品用        ml缓冲液稀释   
    本月药盒抗体用      ml缓冲液稀释
        本月药盒标记用      ml缓冲液稀释    
        本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
 
    本试剂盒主要技术参数:
        测定范围:0.3~16.2ng/ml。   
    灵敏度: <0.3ng/ml。
    精密度:批内CV为<10%    批间CV为 <15%。
    正常参考值:待定,各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
 
    本月药盒参考数据:
       ————————————————————————————————
            T     NSB     S0           S1      S2     S3     S4     S5  
        ————————————————————————————————
        CPM
        ————————————————————————————————
              N/T%      B0/T%     B/ B0 %
        ———————————————————————————————— 
 
      生产日期:
      有效日期:
地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业园东区1号楼12层12A
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