尿钠素放免药盒操作说明书
URO (HY-10051) RIA Kit
尿钠素(URO dilatin URO)是Forssmanm等人1988年从人尿中分离出的一种含有32个氨基酸的多肽。URO是一重要的促尿钠排泄生物活性肽,在机体正常生理或病理状态时发挥重要的作用,与临床某些疾病的发生、发展关系密切,尤其是在处理心脏、肝脏移植后抗急性肾功能衰竭方面有重要意义,但其作用机制尚不完全清楚,因此深入开展这方面的研究,对基础研究和临床医学具有非常现实的意义。
测定盒的组成:
1、 缓冲液二瓶。
2、 URO标记一瓶。
3、 URO抗体一瓶。
4、 URO标准品五瓶:0.3、0.9、2.7、8.1、16.2ng/ml。
5、 分离剂(第二抗体)一瓶。
样品收集:
1、收集12小时尿液,记录总量,留取3~4 ml(必要时分成1ml/管)放-20℃冰箱
备用。
2、留随意尿10 ml,计算两次尿间隔时间及尿量。
3、尿标本处理:取尿标本1 ml加无水乙醇1.5ml (也可取尿标本0.5ml加无水乙
醇0.75~1ml)震混1分钟,3500转/分离心15分钟,将上清倒入青霉素瓶中,在45℃
水浴锅上蒸干(可将水浴锅温度调至80℃左右,锅口上放一铝板,铝板温度约40-45
℃,青霉素瓶置于铝板之上)大约48小时以上样品可完全干燥,干燥后将青霉素瓶加
盖,封口放-20℃保存。测定前,每瓶加PH7.4缓冲液1 ml溶解(如用0.5ml尿液提取,
加缓冲液0.5ml溶解)混匀后取上清200ul测定用。
测定方法:
URO RIA 操作程序 (单位:ul)
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 300 200 —— ——
标 准 品 —— —— —— 200 ——
样 品 —— —— —— —— 200
抗 体 —— —— 100 100 100
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摇匀4℃ 放置48小时
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125I- URO 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀,3500 转/分 离心15分钟,去上清,测定沉淀cpm值。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,在半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。由每ml尿液中含量乘以尿量,再除时间,换算成每小时或每分钟排出量。
注意事项:
本月标准品用 ml缓冲液稀释
本月药盒抗体用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记用 ml缓冲液稀释
本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术参数:
测定范围:0.3~16.2ng/ml。
灵敏度: <0.3ng/ml。
精密度:批内CV为<10% 批间CV为 <15%。
正常参考值:待定,各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
本月药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期:
有效日期:
地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业园东区1号楼12层12A
北京华英生物技术研究所
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