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促肾上腺皮质激素放免试剂盒说明书
ACTHHY-10057  RIA  KIT
 
      ACTH是由垂体前叶细胞分泌的39个氨基酸组成的直链多肽,分子量4500,在循环中的半衰期仅为10~25min。ACTH的生理作用为促进肾上腺皮质增生、合成和分泌皮质类固醇,同时也促进肾上腺素、生长激素合成。ACTH的合成和分泌受下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、肾上腺皮质激素以及加压素的调节。我们利用ACTH18~39片段的特异抗体,建立了特异、灵敏的测定血清、体液中ACTH 18~39片段的放射免疫分析方法。该抗体也能同组织、细胞切片中特异的ACTH和体外纯化的ACTH特异结合,用于临床组织化学诊断ACTH水平变化。因此该方法适用于肾上腺皮质功能亢进、异位ACTH综合症、肾上腺腺瘤和肾上腺皮质功能减退等诸多临床疾病时,血清ACTH水平的监测。
 
药盒组成:
1、ACTH标记一瓶 。 
2、ATCH抗体一瓶。
3、缓冲液一瓶。
4、分离剂(第二抗体)一瓶。
5、ATCH标准品6瓶:0、5、15、45 、135、405pg/ml。
 
标本采集:取静脉血2ml注入含10%EDTA.Na2 30ul和抑肽酶20ul的试管中,混匀4℃,3000rpm/ min离心10min,分离血浆(溶血样品影响测定结果)。如需要可分装2-3份保存,放-20℃可保存2个月。在-70℃可保存半年。测定前,使样本置于室温或冷水中复融,再次4℃,3000rpm/ min离心5min,取上清测定
 
测定方法:             
                            ACTH  RIA  操作程序       单位:ul
             ————————————————————————————
               试   剂      T     NSB      S0     S1~ S6     样  品
             ————————————————————————————
缓 冲 液    ——    200      ——    ——      ——
               零 准 品    ——    ——    100      ——      ——
               标 准 品    ——    ——    ——     100       ——
               样    品    ——    ——    ——     ­——      100
               抗    体    ——    ——    100      100       100
                125I-ACTH    100     100     100      100       100                         
             ————————————————————————————
                              混匀,4℃ 保温16~24小时
             ————————————————————————————
               分 离 剂    ——    500     500      500       500
             ­­­————————————————————————————
       混匀,静置15分钟,3500转/分 离心20分钟,去上清,测沉淀CPM。
 
 
 
 结果计算:
        以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,在
   半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
 
       注意事项:
         本月标准品每瓶用                 ml缓冲液稀释   
         本月药盒抗体每瓶用               ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用                ml缓冲液稀释   
 
       本试剂盒主要技术参数:
         测定范围:5~405pg/ml
         灵敏度:〈5pg/ml。
         精密度:批内CV<4.1%,批间CV<8.4%
         准确度:回收率97~104%,平均回收率96.5。
         正常参考值:
         1、测定本所工作组人员20例(21~45)早8:00血浆中ACTH浓度为7.9~32.1pg/ml;
           均值17.3±5.73pg/ml;下午16:00血浆中ACTH浓度为10.7~30.5pg/ml,均值18.4
           ±5.6pg/ml。
         2、测定门诊查体人群202例(14~76岁),早晨空腹血清中ACTH浓度为
            5.08~32.86pg/ml,均值为14.52~6.22pg/ml。
 
     注意事项
        1、缓冲液和免疫分离剂使用前必须摇匀,不可冰冻保存。
         2、标记品请在使用前溶解和配制。
         3、用户如遇特殊情况,收到药盒后不能在有效期内使用,除标记品外,其他全部
            试剂存在4℃,待下次临用前预购一瓶标记品即可。
 
       本月药盒参考数据:
    —————————————————————————————————————————
           T       NSB       S0           S1      S2         S3      S4       S5      S6   
    —————————————————————————————————————————
    CPM
    —————————————————————————————————————————
             N/T%          B0/T%        B/ B0 %  
    —————————————————————————————————————————
生产日期:2007-6-30
有效日期:2007-7-30
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