促肾上腺皮质激素放免试剂盒说明书
ACTH(HY-10057) RIA KIT
ACTH是由垂体前叶细胞分泌的39个氨基酸组成的直链多肽,分子量4500,在循环中的半衰期仅为10~25min。ACTH的生理作用为促进肾上腺皮质增生、合成和分泌皮质类固醇,同时也促进肾上腺素、生长激素合成。ACTH的合成和分泌受下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、肾上腺皮质激素以及加压素的调节。我们利用ACTH18~39片段的特异抗体,建立了特异、灵敏的测定血清、体液中ACTH 18~39片段的放射免疫分析方法。该抗体也能同组织、细胞切片中特异的ACTH和体外纯化的ACTH特异结合,用于临床组织化学诊断ACTH水平变化。因此该方法适用于肾上腺皮质功能亢进、异位ACTH综合症、肾上腺腺瘤和肾上腺皮质功能减退等诸多临床疾病时,血清ACTH水平的监测。
药盒组成:
1、ACTH标记一瓶 。
2、ATCH抗体一瓶。
3、缓冲液一瓶。
4、分离剂(第二抗体)一瓶。
5、ATCH标准品6瓶:0、5、15、45 、135、405pg/ml。
标本采集:取静脉血2ml注入含10%EDTA.Na2 30ul和抑肽酶20ul的试管中,混匀4℃,3000rpm/ min离心10min,分离血浆(溶血样品影响测定结果)。如需要可分装2-3份保存,放-20℃可保存2个月。在-70℃可保存半年。测定前,使样本置于室温或冷水中复融,再次4℃,3000rpm/ min离心5min,取上清测定
测定方法:
ACTH RIA 操作程序 单位:ul
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试 剂 T NSB S0 S1~ S6 样 品
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缓 冲 液 —— 200 —— —— ——
零 准 品 —— —— 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I-ACTH 100 100 100 100 100
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混匀,4℃ 保温16~24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀,静置15分钟,3500转/分 离心20分钟,去上清,测沉淀CPM。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,在
半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
注意事项:
本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
本试剂盒主要技术参数:
测定范围:5~405pg/ml
灵敏度:〈5pg/ml。
精密度:批内CV<4.1%,批间CV<8.4%
准确度:回收率97~104%,平均回收率96.5。
正常参考值:
1、测定本所工作组人员20例(21~45)早8:00血浆中ACTH浓度为7.9~32.1pg/ml;
均值17.3±5.73pg/ml;下午16:00血浆中ACTH浓度为10.7~30.5pg/ml,均值18.4
±5.6pg/ml。
2、测定门诊查体人群202例(14~76岁),早晨空腹血清中ACTH浓度为
5.08~32.86pg/ml,均值为14.52~6.22pg/ml。
注意事项
1、缓冲液和免疫分离剂使用前必须摇匀,不可冰冻保存。
2、标记品请在使用前溶解和配制。
3、用户如遇特殊情况,收到药盒后不能在有效期内使用,除标记品外,其他全部
试剂存在4℃,待下次临用前预购一瓶标记品即可。
本月药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期:2007-6-30
有效日期:2007-7-30
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