肾上腺髓质素放免药盒操作说明书
ADM（HY-10058） RIA KIT
肾上腺髓质素（Adrenomedullin ADM）是一种由52个氨基酸组成，分子量为6028.8Da的内源性血管活性肽，广泛分布于内分泌、神经、心血管、呼吸、泌尿、消化等系统中，其中以肾上腺含量最高，肺和心脏次之。其主要生物学作用：扩张血管，具有强力、长效降压作用；增加肾小球滤过率和肾血流量，具有利尿、利纳作用。对血流动力学作用：使平均动脉压显著降低，心率、心输出量、每博容量显著增加。目前研究发现：ADM（16-52及23-52）可使血糖降低，胰岛素升高。ADM能显著抑制小牛血清和血小板衍化生长因子-BB所致的血管平滑肌细胞的迁移，表明ADM可能作为局部抗迁移因子在某些病理、生理状态中起作用。ADM与ET相互作用，共同维持循环系统功能的稳定状态，由于ADM广泛存在于中枢神经系统，提示有可能作为一种神经递质或神经激素，发挥生物学作用。根据免疫竞争原理，用非平衡法建立检测血浆ADM水平的放射免疫分析方法。
标本收集：空腹抽静脉血4ml于特凝管中（含有10%EDTA . Na2 30ul和抑肽酶40ul）,实验前标本需过 C18柱。
该药盒主要应用范围：
* 高血压、冠心病的研究。
* 糖尿病、肺心病、肾病的研究。
* 血流动力学的研究。
* ADM与其他激素关系的研究。
药盒组成：
1． ADM标记一瓶； 2.ADM抗体一瓶；
3. ADM标准品5瓶，分别为10、20、40、80、160pg/ml。
4． 缓冲液一瓶； 5.分离剂（第二抗体）一瓶。
操作方法：
ADM RIA 操作程序 （单位：ul）
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试 剂 T NSB S0 标准品 标 本
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
标 本 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
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充分混匀，放4℃ 24小时
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125I- ADM 100 100 100 100 100
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充分混匀，4℃ 24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温放置1.5小时后，3500转/分 离心 20分,去上清，测沉淀CPM值。
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测物结合百分率，在
半对数座标纸上绘制标准曲线，并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
注意事项：
本月每瓶标准品用 ml缓冲液稀释；
本月每瓶抗体用 ml缓冲液稀释；
本月每瓶标记用 ml缓冲液稀释。
本试剂盒主要技术参数：
NSB：<5%。
灵敏度：<25pg/ml。
精密度：批内CV<7.7%,批间C
正常参考数据：18.16±7.5 Pg/ml
附：血浆标本过柱步骤：
1、取0.5ml血浆和0.5ml含1%的TFA(缓冲液A )，在4℃下3500转/分 离心20分钟，取上清。
2、在含60%乙晴溶液中加1%TFA，即为缓冲液B，将缓冲液B 3ml对Sep-Pak C18 柱进行平
衡，接着用缓冲液A 3ml 冲洗。
3、将1处理的上清血浆缓慢注入Sep-Pak C18柱中。
4、用缓冲液A 5ml 以1ml/2分钟速度淋洗Sep-Pak C18 柱。
5、再用缓冲液B 3ml淋洗Sep-Pak C18，速度为1ml/3分钟，并收集上述淋洗液。
6、将上述淋洗液全部分别装入10ml西林瓶中，-42℃ 冷冻干燥 ，备用。
7、取干燥后的西林瓶用250 ul 0.05M PH 7.4 PB 进行溶解，并在振荡器上振荡3分钟。实
验时取200ul进行加样。操作步骤见说明书。
8、结果计算：最终浓度×5.0
Sep-Pak C-18: Waters.inc. Massachusetts.USA TFA:SIGMA .CO .USA 药盒不提供上述二种试剂（或材料）。
该说明书由英国皇家医学院内分泌部《ADM药盒操作说明书》翻译而来。
Department of Endocrinology Royal Postgraduate Medical School
本次药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期：
有效日期：
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