血清胰岛素抗体半定量测定说明书
INS Ab(HY-10070)RIA KIT
胰岛素依赖型糖尿病患者注射胰岛素后,由于胰岛素的异源免疫性和提取不纯等因素,将使患者产生胰岛素抗体。这些抗体的一部份能结合血循环中的胰岛素变成胰岛素一胰岛素抗体复合物。这种复合物的胰岛素失去生物活性,如果复合物一旦解离其胰岛素又将产生生物活性。血清含有胰岛素抗体在实施血清胰岛素放免测定时,等于在样品管的放免系统中加入额外量胰岛素抗血清,这样样品测值将大于B0管 — 也就是将<0μU/ml。如果用双抗体分离系统样品管cpm将产生很低现象。所以血清胰岛素抗体阳性的样品,在胰岛素放免测定时将失去其测定的意义。这类病例只有测定C肽才能反映胰岛B细胞的功能。应用本测定盒的材料可以测定血清胰岛素抗体的百分率(半定量法),可以作为胰岛素耐药的研究,如进行定量测定请见参考文献。
药盒组成:
1、 125I-胰岛素1瓶。
2、 缓冲液 1瓶。
3、 免疫分离剂(第二抗体,18%PGG) 1瓶。
4、 载体蛋白 1瓶。
操作程序:
INS Ab RIA操作步骤 (单位:ul)
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T NSB 样 品
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缓 冲 液 —— 300 200
样 品 —— —— 100
125I胰岛素 100 100 100
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4℃ 24小时
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PEG18% —— 500 500
载体蛋白 —— 100 ——
缓 冲 液 —— —— 100
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混匀, 35000转/分 离心15分钟去上清,测定沉淀cpm值。
125I胰岛素1000cpm/100ul为宜。
结果计算:
样品 cpm - 空白cpm
血清胰岛素抗体= ————————————×100
总T cpm - 本底cpm
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,在半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
正常参考值:>3.5%为阳性;
<3.5为阴性。
注意事项:
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释。
生产日期:
有效日期:
参考文献:
1、Palumlo, A.et al: Quantitative evalution of insulin antilodies by radiochemical analysis.
Clin. Chem.Acta 82:25,1978.
2、Nogami,S.et al:Serum insulin radioimmunoassay using polyethylene glycol(PEG)
method.Detectilon of insulin antibody by PEG precipitation and cellulose acetate
electrophoresis.
Kaku Igaku 20(1):83—891983
3、吕植等:血清胰岛素抗体的测定,白求恩医科大学学报,3:30,1982
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