IV型胶原放免试剂盒操作说明书
Ⅳ-C (HY-10086)RIA KIT
Ⅳ型胶原(Type Ⅳ Collage Ⅳ-C)是基底膜的主要成份之一,分子呈丝状,头尾分别相连形成网状结构,在血清中可出现三种主要的降解片断:长链7S、短链7S、NC1。Ⅳ-C主要由系膜细胞、内皮细胞和脏层上皮细胞、贮脂细胞产生。在正常情况下Ⅳ-C主要分布在血管、淋巴管、胆管的基底膜中,形成具有三维空间结构的胶原网,对毛细血管壁起支撑作用,缓解毛细血管内血压对管壁压迫,为基膜内其它成份提供组合支架,与Laminin及硫酸肝素多糖蛋白结合,共同维持基底膜的通透性。有文献报道:Ⅳ-C血清水平与肝纤维及肾病患者的肾小球病理改变成正相关。根据免疫竞争原理,用平衡法建立了Ⅳ-C放射免疫分析方法。
该药盒主要应用范围:
1、肝纤维化早期诊断及预后;
2、肾小球病理改变或硬化过程的评估;
3、甲亢、糖尿病、硬皮病及癌转移的机理的研究;
4、心脑血管疾病的研究。
试剂盒组成:
1、Ⅳ-C标准品(液体)7瓶,浓度为0、20、40、80、160、320、640ng/mL。
2、Ⅳ-C 抗体(蓝色液体)1瓶。
3、125I-Ⅳ-C(红色冻干品)1瓶。
4、分离剂(第二抗体)2瓶,用前充分混匀。
5、缓冲液1瓶。
样品收集:
取静脉血2ml ,注入试管中待凝固后,分离血清,-20℃保存2个月。测定前置
室温或冷水中复融,混匀后,4℃ 3000rpm/ min离心5 min,取上清测定。
测定方法:
Ⅳ-C RIA加样步骤 单位:ul
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试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品
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零 标 准 —— 300 200 —— ——
标 准 品 —— —— —— 200 ——
样 品 —— —— —— —— 200
抗 体 —— —— 100 100 100
125I-Ⅳ-C 100 100 100 100 100
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充分混匀,2-8℃过夜(16-24)小时
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分 离 剂 —— 1000 1000 1000 1000
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充分混匀后,4℃放置15分钟, 3500转/分 离心15分钟,去上清,测沉淀cpm。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,在半对
数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
注意事项:
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术参数:
标准曲线范围:20~640 ng/mL。
灵敏度:10ug/L。
精密度:批内CV为5%,批间CV为 10% 。
正常参考值:应用本试剂盒测定211例健康人,空腹血清IV-C浓度为
68.5 ±22.0 ng/mL。
本月药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6
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CPM
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N/T% 3.0 B0/T% 40 B/ B0 % 82 72 60 44 30 20
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生产日期:2007-6-27
有效日期:2007-7-30
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