透明质酸放免试剂盒操作说明书
HA(HY-10088)RIA Kit
透明质酸(Hyaluronic Acid.HA)是一种广泛存在于细胞外基质中的高分子多糖,主要由肝内皮细胞进行降解,肝组织正常结构受到损伤时,一方面HA的合成增加,另一方面肝脏对HA的降解能力下降,导致血清中HA水平明显增高.并且增高的程度与肝组织炎症及纤维化程度呈正相关.
急性肝炎、慢性活动性肝炎，肝硬化以及肝癌导致的血清HA水平增高，某些恶性肿瘤，肺心病患者的血清HA水平也会增高，慢性肝火在用干扰素或激素进行治疗时，伴有血清HA水平下调。
胚胎儿血清HA极高，新生儿血清HA仍维持在较高水平，随着年龄增长血清HA逐渐降低，到中、老年又略有升高。
血清HA水平是反映肝纤维化的重要指标，也用于抗纤维化药物治疗时的动态观察。
试剂盒组成：
1、HA标准品（液体）7瓶，浓度为0、25、50、100、200、400、800ng/mL。
2、HA 抗体（绿色液体，HA结合蛋白抗体）1瓶。
3、125I-HA（红色液体）1瓶。
4、分离剂（第二抗体）1瓶，用前充分混匀。
5、透明质酸结合蛋白（蓝色液体，HABP）。
6、HA质控血清（冻干品）2瓶。
样品收集：
取静脉血分离血清，48小时内测量可在2－8℃密闭保存；超过48小时－20℃密闭冷冻保存，至少稳定2个月，但要避免反复冻融。
测定方法：
HA RIA加样步骤 单位：ul
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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S0 —— 150 50 —— ——
标 准 品 —— —— —— 50 ——
样品或质控 —— —— —— —— 50
HABP —— —— 100 100 100
125I-HA 100 100 100 100 100
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37℃水浴60分钟
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HA抗体 —— 100 100 100 100
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37℃水浴40分钟
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分 离 剂 —— 100 100 100 100
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充分混匀后，4℃放置20分钟, 3500转/分 离心15分钟,去上清，测沉淀cpm。
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测物结合百分率，在半对
数座标纸上绘制标准曲线，并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
注意事项：
本月药盒标记每瓶用 -------- ml缓冲液稀释
本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
本试剂盒主要技术参数：
标准曲线范围：25~800ug/L。
灵敏度：5.5ug/L。
精密度：批内CV为10%,批间CV为 15% 。
正常参考值：：0 ~ 100 ng/ml,中老年测值略高，进食后血清测值高于空腹血。
肝病、慢活肝>160 ng/ml ; 肝纤维化>250 ng/ml,
本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期：2007-6-29
有效日期：2007-7-30
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