透明质酸放免试剂盒操作说明书
HA(HY-10088)RIA Kit
透明质酸(Hyaluronic Acid.HA)是一种广泛存在于细胞外基质中的高分子多糖,主要由肝内皮细胞进行降解,肝组织正常结构受到损伤时,一方面HA的合成增加,另一方面肝脏对HA的降解能力下降,导致血清中HA水平明显增高.并且增高的程度与肝组织炎症及纤维化程度呈正相关.
急性肝炎、慢性活动性肝炎,肝硬化以及肝癌导致的血清HA水平增高,某些恶性肿瘤,肺心病患者的血清HA水平也会增高,慢性肝火在用干扰素或激素进行治疗时,伴有血清HA水平下调。
胚胎儿血清HA极高,新生儿血清HA仍维持在较高水平,随着年龄增长血清HA逐渐降低,到中、老年又略有升高。
血清HA水平是反映肝纤维化的重要指标,也用于抗纤维化药物治疗时的动态观察。
试剂盒组成:
1、HA标准品(液体)7瓶,浓度为0、25、50、100、200、400、800ng/mL。
2、HA 抗体(绿色液体,HA结合蛋白抗体)1瓶。
3、125I-HA(红色液体)1瓶。
4、分离剂(第二抗体)1瓶,用前充分混匀。
5、透明质酸结合蛋白(蓝色液体,HABP)。
6、HA质控血清(冻干品)2瓶。
样品收集:
取静脉血分离血清,48小时内测量可在2-8℃密闭保存;超过48小时-20℃密闭冷冻保存,至少稳定2个月,但要避免反复冻融。
测定方法:
HA RIA加样步骤 单位:ul
———————————————————————————
试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
———————————————————————————
S0 —— 150 50 —— ——
标 准 品 —— —— —— 50 ——
样品或质控 —— —— —— —— 50
HABP —— —— 100 100 100
125I-HA 100 100 100 100 100
——————————————————————————
37℃水浴60分钟
——————————————————————————
HA抗体 —— 100 100 100 100
——————————————————————————
37℃水浴40分钟
——————————————————————————
分 离 剂 —— 100 100 100 100
——————————————————————————
充分混匀后,4℃放置20分钟, 3500转/分 离心15分钟,去上清,测沉淀cpm。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,在半对
数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
注意事项:
本月药盒标记每瓶用 -------- ml缓冲液稀释
本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术参数:
标准曲线范围:25~800ug/L。
灵敏度:5.5ug/L。
精密度:批内CV为10%,批间CV为 15% 。
正常参考值::0 ~ 100 ng/ml,中老年测值略高,进食后血清测值高于空腹血。
肝病、慢活肝>160 ng/ml ; 肝纤维化>250 ng/ml,
本月药盒参考数据:
——————————————————————————————
T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
——————————————————————————————
CPM
——————————————————————————————
N/T% B0/T% B/ B0 %
——————————————————————————————
生产日期:2007-6-29
有效日期:2007-7-30
地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业园东区1号楼12层12A
北京华英生物技术研究所
免费电话:8008109828
邮 编: 100085
电 话:(010)88114651 (010) 56146198
传 真:(010)88112680
网址:www.sinoukbio.com
E-Mail:sinouk@163.com
QQ客服:1749417768