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粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子药盒说明书

GM-CSF(HY-10114) RIA  KIT

 

       粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor  GM-CSF)是一种能在造血干细胞、祖细胞和成熟细胞不同水平上促进其生成的造血因子和内源性调节因子,由127个氨基酸组成,分子量为14KD的酸性糖蛋白,其靶细胞:骨髓不同发育阶段的造血细胞、内皮细胞。其生物学作用:对上述靶细胞有增殖作用,能增加人体造血功能和免疫功能,能诱导白介素、干扰素的产生及分泌。初步临床观察:白血病病人血清GM-CSF 浓度明显高于正常人血清;血小板紫癫病人血清GM-CSF浓度是正常人的五倍以上;免疫功能低下的病人的GM-CSF浓度明显低于正常人。根据免疫竞争原理,用平衡法建立了GM-CSF放射免疫分析方法。

药盒主要应用范围

 * 血液病的研究

 * 造血功能和免疫功能的研究

 * 细菌性感染与病毒性感染的鉴别诊断

 * 化疗前后疗效及血药浓度的观察

 * 心脑血管疾病的研究

 药盒的组成及配制

1、GM-CSF 标准品6瓶:浓度为0、50、100、200、400、800pg/ml。

2、125I- GM-CSF 2瓶。

3、抗体1瓶。

4、缓冲液 1瓶.

5、分离剂(第二抗体)1瓶。

6、标准品稀释液   1瓶。

 样品收集:

         取空腹静脉血2ml于试管中,凝固后分离血清,-20℃可保存二个月。

 操作方法

               GM-CSF   RIA   操作表       单位:ul

       —————————————————————————

         试 剂      T    NSB       S0~ S5     标本管

       —————————————————————————

        缓 冲 液   ——    200        ——      ——

        标 准 品   ——    ——       200       ——

        标    本   ——    ——       200       ——

        抗    体   ——    ——       100       100       

        标    记   100     100        100       100

       —————————————————————————

                         混匀, 4℃放置24小时

       —————————————————————————

        分 离 剂   ——    500        500       500    

       —————————————————————————

  混匀,室温放置20分钟,3500转/分 离心 15分钟,吸弃上清液,测沉淀cpm。

 

结果计算:

         以N/T、B/T计算NBS、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,

    在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值。或由自动γ-计数器预先编制程序,直 接

    给出有关参数,标准曲线及样品浓度。

注意事项

        本月标准品每瓶用        ml标准品稀释液稀释    “0”标准品不用稀释直接使用

        本月药盒抗体每瓶用      ml缓冲液稀释         

        本月药盒标记每瓶用      ml缓冲液稀释 

            本月分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)。

技术指标

         NSB:<5%

        灵敏度:<2 pg/ml

         曲线范围:0-800 pg/ml

         批內变异系数<6%

         批间变异系数<10%

         特异性:本血清与IL-2、IL-6、TNF-α无交叉反应,与C-CSF交叉反应<5%

         正常参考值:

                      50.1~102.5pg/ml;  均值:65.31±12.11 pg/ml

                      各实验室应根据自己的条件建立自己的正常值:               

本月药盒参考数据

        ———————————————————————————————————————

                 T      NSB      S0            S1       S2       S3       S4       S5  

        ———————————————————————————————————————

         CPM

        ———————————————————————————————————————

                    N/T%       B0/T%         B/ B0 %

        ———————————————————————————————————————                 

          

           生产日期:

           有效日期: 

 

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