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肿瘤坏死因子放免试剂盒操作说明书
                                                 TNFαHY-10116 RIA  KIT  
       
    肿瘤坏死因子(Tunmor  necros  factor-α  TNFα)是八十年代发现由巨噬细胞和单核细胞分泌的一种重要的细胞因子。由157个氨基酸组成、分子量为17KD的多肽。其主要生物学作用:参与抗感染、凝血、发热、休克、多器官功能衰竭、恶病质等多种病理生理过程;对白细胞、内皮细胞等多种细胞的功能及细胞的生长与分化均有激素样作用,同时对肿瘤坏死退化产生积极作用。因此,测定血清或其它体液中的TNF浓度,在基础医药学和多种疾病诊断研究中是一项很有价值的指标。
本药盒采用液相竞争法,标记TNF和待测样品中的TNF竞争性的与特异抗体结合,以PR试剂为分离剂,操作简便、准确性和灵敏度高。
 
标本的收集:取静脉血2ml于试管中,凝固分离血清,-20℃保存二个月
     药盒组成:
  1、TNFα标记一瓶
 2、TNFα抗体一瓶
  3、缓冲液一瓶
  4、分离剂(第二抗体)一瓶。
  5、TNF标准品六瓶3、9、27、81、243pg/ml。
     测定方法
                         TNF α RIA  操作程序        (单位:ul)
             ————————————————————————————
               试   剂      T     NSB    S0    S1~S5    样  品
             ————————————————————————————
              缓 冲 液    ——    200    100    ——     ——
               零 标 准    ——    ——   100    ——     ——
               标 准 品    ——    ——   ——    100     ——
               样    品    ——    ——   ——   ——      100
               抗    体    ——    ——    100    100      100                        
           125I- TNFα  100     100     100    100      100
            ————————————————————————————                   
                           摇匀4℃ 放置24小时
            ————————————————————————————
               分 离 剂    ——    500      500    500      500
            ————————————————————————————
        混匀,室温放置15分钟, 3500转/分 离心15分钟,弃上清,测沉淀CPM。
结果计算:
    以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,在半对
数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读结果。
  
注意事项:
  1、本月药盒抗体每瓶用   10.5      ml缓冲液稀释
2、本月药盒标记每瓶用    10.5      ml缓冲液稀释
3、本月标准品每瓶用       0.5      ml缓冲液稀释.
      4、本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
 主要技术指标:
   1、NSB:< 7% ,S0  30~40%
   2、标准曲线范围:3~243pg/ml。
   3、灵敏度:最小检出值:<0.3pg/ml .
   4、准确性:回收率平均:95 ~106%。
   5、批内变异系数:CV 5%;
      批间变异系数:CV 8% 。
 
   正常参考值:50例正常人血清平均:54±10.40pg/ml
   本月药盒参考数据:
    —————————————————————————————————————————
            T        NSB      S0             S1        S2        S3         S      S5   
    —————————————————————————————————————————
    CPM
    —————————————————————————————————————————
N/T%    2.7    B0/T%   68    B/ B0 %    95         78          65         37       15      
   —————————————————————————————————————————
 
     
      生产日期:2007-3-30
      有效日期:2007-4-30
    
     
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