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白细胞介素-2放免药盒操作说明书
                                                                         IL-2HY-10102 RIA  KIT
 
    白细胞介素-2 (Interleukin-2 IL-2)主要由活化的T淋巴细胞产生,天然的IL-2含有糖基,基因重组IL-2不含糖基,由133个氨基酸组成,分子量度15KD。其主要生物活性是促进T淋巴细胞和NK细胞的增殖,促进B细胞分化增殖,促进抗体生成等。因此IL-2在机体免疫应答、免疫调节和抗肿瘤免疫中具有重要作用。IL-2产生或表达异常与临床疾病有密切关系,通过测定人外周血、尿液或人激活淋巴细胞培养上清液中的IL-2水平,可作为对肿瘤、心血管病、肝病、红斑狼疮、麻风病、艾滋病等疾病诊断、预后及观察的方法,并用于器官移植后有无排斥反应的早期诊断。IL-2含量测定是基础研究和临床上应用IL-2免疫治疗的重要辅助指标之一。
    药盒组成:(常温运输,4℃保存)
1.  IL-2缓冲液(PBS)1瓶; 直接使用。
2.  PR分离剂(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。
3.  IL-2标准品5瓶,浓度为1、3、9、27、81 pg/ml。
4.  IL-2抗体2瓶,请将两瓶混匀后使用。
5.  125I - IL-2  1瓶(冻干品)。
    样品收集
    取静脉血2ml ,注入试管中待凝固后,分离血清,-20℃保存2个月。测定前置室温或
冷水中复融,混匀后,4℃ 3000rpm/ min 离心5 min,取上清测定。
     测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
                       IL-2  RIA加液程序    (单位: ul )
           ————————————————————————————
              试   剂      T     NSB      S0     S1~S5      样  品
           ————————————————————————————
              缓 冲 液    ——    200     100     ——      ——
              标 准 品    ——    ——    ——    100       ——
              样    品    ——    ——    ——    ——      100
              抗    体    ——    ——    100     100       100
         125I-IL-2      100     100      100     100       100
           ————————————————————————————
                             摇匀4℃ 放置24小时以上
           ————————————————————————————
              分 离 剂    ——   500      500     500       500
           ————————————————————————————
混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。
 
 结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项:  
      本月标准品每瓶用     0.5     ml 缓冲液稀释
      本月药盒抗体每瓶用   5.5     ml缓冲液稀释
      本月药盒标记每瓶用    5.5   ml缓冲液稀释
      本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
   本试剂盒主要技术指标:
1、  NSB:<5%。
2、  灵敏度:<0.1pg/ml。
3、  标准曲线范围:1~81pg/ml。
4、  批内变异系数:CVw<7.0 %;
      批间变异系数:CVw < 10% 。
5、  特异性:本血清与TNF、IL-6、IFN、IL-8等均无交叉反应。
6、  正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
                32±10ng/ml(n=50)。
     本月药盒参考数据:
    —————————————————————————————————————————
           T       NSB       S0           S1        S2          S3         S4         S5    
    —————————————————————————————————————————
    CPM
    —————————————————————————————————————————
             N/T%   2.7  B0/T%     43     B/ B0 %   91       80        60        33       20            
    —————————————————————————————————————————
 
      生产日期:20074-30
      有效日期:2007-5-30
  
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