白细胞介素-4放免药盒操作说明书
IL-4（HY-10103）RIA KIT
白细胞介素-4（Interleulin -4, IL-4）是由活化的Th2细胞产生的一种细胞因子，分子量为15KD。IL－4具有多种生物学效应，在T细胞、B细胞、巨噬细胞的增殖分化及功能调控方面起重要调节作用。据文献报导，在硬皮病、多发性硬化症、自身免疫甲状腺疾病、炎性肠道疾病，支气管哮喘、特应性皮炎等变态反应过敏性疾病时，机体IL－4水平显著增加。本试剂盒利用自制免抗IL－4血清，建立了IL－4放射免疫测定法，通过测定人体血清，体液或培养上清液中的IL－4水平，可辅助临床某些疾病的诊断，为进一步探讨其作用机制与临床药理对各系统疾病的防治提供了一项可靠的手段。
药盒组成：（常温运输，4℃保存）
１、 IL-4缓冲液1瓶。
２、 PR分离剂（第二抗体）1瓶
３、 IL-4标准品（冻干品）6瓶：浓度为0、、5、10、20、40、80 pg/ml。
４、 IL-4抗体1瓶（冻干品）。
５、 125I - IL-4 2瓶（冻干品）。
样品的收集：
1、取静脉血2ml，注入试管中待凝固后，分离血清，－20℃保存2个月。测定前置室温或冷水中复融混匀，4℃3000rpm，离心5min,取上清测定。
2、组织样品处理：取出活组织，吸去血迹，称重，尽快放入生理盐水1 ml略作碾磨，然后在100℃水浴中煮沸10 min，匀浆。4℃3000 rpm，离心15min,取上清－20℃保存。,测定时用PBS稀释。另外每种组织样品非特异结合（U0）可能有差异，每份标本最好单独做U0。取组织的重量一般在0.5mg左右为好。
测定方法：
IL-4 RIA加液程序 （单位： ul ）
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 300 200 —— ——
标 准 品 —— —— —— 200 ——
样 品 —— —— —— —— 200
抗 体 —— —— 100 100 100
125I IL- 4 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温放置15分钟后，4℃ 3500转/分 离心 15分钟 ，弃上清液，测沉淀cpm。
（注意：本试剂盒不能测免血清，鼠血清中含量较低需浓缩5倍方可测定。）
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，
在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值，或由自动r计数仪预先编制程序，直接给
出有关参数，标准曲线及样品浓度。
注意事项：
本月标准品每瓶用 1 ml缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 10 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 5.5 ml缓冲液稀释
本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
主要技术指标：
1、灵敏度：0.03pg/ml。
2、测定范围：0~80pg/ml。
3、批内变异系数：CVw<8 %,
批间变异系数：CVw < 15% 。
4、特异性：IL-4抗血清IL－1、IL-2、、IL-6、IL-8、EPO、BGP、TNF、CT等均无交叉反应。
5、NSB＜8％。
6、正常参考值：各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
8.5±1.7 ng/ml(n=166)。
本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期：
有效日期：
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