白细胞介素-6放免药盒操作说明书
IL-6(HY-10105)RIA KIT
白细胞介素-6(Interleukin -6 , IL-6)主要是由巨噬细胞、T细胞、B细胞等多种细胞产生的一种糖蛋白,分子量为21-26KD。具有调节免疫应答、急性期反应及造血作用,并参与机体炎症反应和抗感染防御作用外,还与自身免疫疾病和某些肿瘤的发生和转归密切相关。椐文献报导在机体损伤、炎症、类风湿性关节炎、多发性骨髓瘤、系统性红斑狼疮、肝炎、烧伤及肾脏移植排斥反应等病人体液中IL-6水平有不同程度升高。本药盒利用免抗IL-6血清建立的液相竞争放免方法,其灵敏度、特异性及稳定性均达到方法学所要求的指标,可测定血清、体液和培养上清IL-6浓度,能辅助临床某些疾病的诊断,以及对病情、预后及疗效进行评估,并为研究与IL-6相关病症的分子病理、生理学提供可靠工具。
药盒组成:(常温运输,4℃保存)
1.IL-6缓冲液1瓶,用蒸馏水稀释至50ml。
2.IL-6 抗体 1 瓶(冻干品)。
3.125I -IL-6 1瓶(冻干品)。
4.IL-6标准品5瓶,浓度50、150、250、500、1000pg/ml。
5.分离剂(第二抗体)1瓶:4℃保存,用前充分摇匀。
样品收集:
取静脉血2ml ,注入试管中待凝固后,分离血清,-20℃保存2个月。测定前置室温或冷水中复融,混匀后,4℃ 3000rpm/ min离心5 min,取上清测定。
测定方法:
IL-6 RIA 加液程序 (单位: ul )
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I- IL-6 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀,室温放置20分钟后,3500转/分4℃离心25 分钟 ,弃上清液,测沉淀cpm数。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半
对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有
关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项:
本月标准品每瓶用 0.5 ml缓冲液稀释;
本月药盒抗体每瓶用 10.5 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 5.5 ml缓冲液稀释
本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术指标:
NSB:<5%。
灵敏度:5pg/ml。
标准曲线范围:50~1000pg/ml。
精密度:批内CV<7.0 %, 批间CV < 15% 。
特异性:本血清与TNF、IL-2、IL-8、IGF2、TGF-а等均无交叉反应。
正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
108.85±41.48pg/ml(n=30)。
本月药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% 5.8 B0/T% 50 B/ B0 % 91 74 60 39 17
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生产日期:2007-3-30
有效日期:2007-4-30
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