白细胞介素 8放免试剂盒操作说明书
IL–8（HY-10106） RIA KIT
白细胞介素–8（Interleukin–8 IL–8）是由单核细胞、巨噬细胞、血管内皮细胞和T细胞等多种细胞产生的一种蛋白质。它由72个氨基酸组成，分子量为 8.4–8.9Kda。对特异和非特异的免疫反应细胞具有强烈的趋化作用。主要是趋化和激活嗜中性粒细胞，并参与嗜中性粒细胞与内皮细胞粘附过程的调节。在炎症局部及败血症患者的外周血中均可检测到较高水平的IL–8，可帮助炎症性疾病的诊断和鉴别诊断。此外严重感染病人血清中IL–8水平与炎症因子IL–6的水平、并发症的发生预后有密切相关。因此IL–8有望作为炎性疾病的临床诊断指标。本试剂盒的建立对于IL–8的基础和临床研究具有重要意义。
药盒组成：（常温运输，4℃保存）
1、 IL-8缓冲液1瓶。
2、 IL-8抗体 1瓶。
3、 125I -IL-8 1瓶。
4、 IL-8标准品6瓶，浓度 分别为5、 101、20、40、80、160 pg/ml。
5、 PR分离剂(第二抗体)1瓶：4℃保存，用前充分摇匀。
样品收集：
取静脉血2ml ，注入试管中待凝固后，分离血清，-20℃保存2个月。测定前置室温或
冷水中复融，混匀后，4℃ 3000rpm/ min离心5 min，取上清测定。
测定方法：本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：
IL-8 RIA 加液程序 （单位： ul ）
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试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I- IL-8 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放置24小时
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PR试剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温放置15分钟，3500转/分4℃离心25分钟，吸弃上清，测定沉淀cpm数。
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半
对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值，或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有
关参数，标准曲线及样品浓度。
注意事项：
本月标准品每瓶用 1.0 ml缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 10.5 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 10.5 ml缓冲液稀释
本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
本试剂盒主要技术指标：
1、 NSB：<5%。
2、 灵敏度：<0.5pg/ml。
3、 标准曲线范围：5~160pg/ml。
4、 精密度：批内CV<8.0 %, 批间CV < 15% 。
5、 特异性：本血清与 IL-2、IL-6、等均无交叉反应。
正常参考值：各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
40±8 pg/ml
本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6
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CPM
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N/T% 2.0 B0/T% 50 B/ B0 % 93 80 70 56 27 18
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生产日期：2007-3-30
有效日期：2007-4-30
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