转化生长因子-α放免药盒操作说明书
TGF-α（HY-10118）RIA KIT
转化生长因子-a（Transforming growth factor –a TGFa）是80年代初发现的一种新的多肽生长因子，和EGP（Epidermal growth factror EGF）为同一家族。TGFa 具有较强的促进细胞DNA的合成。因此，通常可促进或诱发肿瘤转化。TGFa一般在肿瘤细胞中合成较丰富，通过反转录病毒，原癌基因和化学物质使细胞转化。它与生殖和消化系统生理生化及肿瘤的发生发展等有关。因此，测定血清和其它体液中TGFa含量，在基础医学和临床疾病的研究中是一项有价值的指标。
测定盒组成（常温运输，4℃保存）
1、TGFa标记一瓶 。 2、TGFa抗体一瓶。 3、缓冲液一瓶。
4、分离剂（第二抗体）一瓶。
5、TGFa 标准品五瓶：3.3、10、30、90、270pg/ml。
样品收集：
1．常规静脉取血，分离血清-20℃保存备用，（样品冰冻保存一个月内测定）。
1． 组织：取新鲜活组织即刻置液氮中保存。或快速称取10-20mg置微型匀浆器中，加无水乙醇0.1ml研磨，再加生理盐水0.1ml充分研磨制成匀浆， -20℃以下保存，测定前4℃离心（3000 rpm/ min 15min）取上清测定（浓度高时作适当稀释）。
2． 尿液：收集12小时尿液，即晚7时排尿，向容器内加冰醋酸或甲苯2ml防腐，至次日早7时留取12小时内尿液收集至瓶中，混匀，量总ml数，留5ml
放-20℃以下保存。测定前调至pH 7.0。
测定方法：
本法采用非平衡法，全部测定在聚苯乙烯管中进行。
TGFa RIA 操作程序（单位：ul）
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 250 200 —— ——
标 准 品 —— —— —— 200 ——
样 品 —— —— —— —— 200
抗 体 —— —— 50 50 50
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充分混匀，4℃ 24小时
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125I- TGFa 50 50 50 50 50
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充分混匀，4℃ 24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，混匀3500 转/分 4℃ 离心20分钟去上清，测定沉淀cpm值。
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测物结合百分率，在半对数座标纸上绘制标准曲线，并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
注意事项：
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释；
本月药盒标准每瓶用 ml缓冲液稀释
本月分离试剂在使用前充分混匀（不可冰冻）。
测定兔血清时，应改用25%PEG做分离剂，每管加500ul（离心前，NSB、S0~S5
管补加Υ球蛋白液100ul/管，样品管补加PBS 100ul/管，然后再加25%PEG500ul）。
本试剂盒主要技术参数：
NSB：<4%。
标准曲线范围：3.3~270 pg/ml。
灵敏度：<5pg/ml。
精密度：批内CV<4.4%,
回收率：97~103。
特异性：本试剂盒分别与ET、CGRP、NT、NPY、TNF、BGP、MTL交叉反应
CV<0.1%。
正常参考值：9.5±1.6pg/ml(n=20)。
附注：
1、血液采集后尽快分离血浆，放-20℃以下保存至少3个月内稳定。
2、组织样品测出样品浓度后，再根据称取组织量，计算出每mg组织中的
浓度。尿液样品从每ml浓度再计算出每小时或每分钟排出量。
3、125I-TGFa冻干品请在使用前配制。
4、本试剂盒有效期为40天。
本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期：
有效日期：
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