人胰岛素样生长因子放免药盒说明书
IGFⅠ(HY-10119)RIA KIT
人胰岛素样生长因子(Human InsuIin-Like Crowth Factor, IGF )于1957年由SaLmon和Daughaday发现,命名为生长价素(Somatomedin)。后经研究确认其结构与胰岛素相类似,具有生长调节作用,于1978年定名为IGF。IGF-1是由70个氨基酸残基组成的单链多肽,分子量7649,其1-29肽段顺序相似于胰岛素B链(B2-B30)顺序,42-62肽段顺序相似于胰岛素A链,其中间段明显区别于胰岛素原的连接肽区,为12肽,且结构差异较大。IGF-1具有促进生长发育、促进物质代谢、降低血糖及促进细胞分裂增殖的作用,与儿童发育异常代谢紊乱、糖尿病和肿瘤的发生发展关系密切。
测定盒组成:
1.标准品6瓶: 6、17、35、70、150、300ng/ml (用前用缓冲液A 1.0 ml稀释).
2.缓冲液A,缓冲液B各一瓶
3. IGF—I抗体 1 瓶;每瓶5/10ml.
4. 125—I GFI 2 瓶(每瓶用缓冲液B 5.0 ml稀释),标记物复溶后一次性使用。
5.免疫分离剂(第二抗体):1瓶;
6、质控血清:2瓶。临用前加缓冲液B1.0ml复溶,略静置并混匀,复溶后一次性使用。
样品准备:
本系统采用血清标本,标本检测前标本用生理盐水10倍稀释 (或见注意事项后的样品提取).
待测血清须空腹,静脉取血即可。
样本最好进行提取,可避免胰岛素样生长因子结合蛋白的干扰。(见注意事项后的标本提取方法)
实验步骤:
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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蒸 溜 水 —— 100 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I- IGFI 100 100 100 100 100
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混匀,4℃15-24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀,室温放置30分钟后,3600 转/分 离心20分钟,去上清,测定沉淀cpm值。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,在半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。结果×10.为最终结果。注:结果×10..
注意事项:
本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
样品提取(推荐使用):
1、取血清样品0.1ml, 加酸/乙醇(95%乙醇:2M HCL=87.5:12.5)0.4ml,充分混匀,置室温 30分钟,4℃离心3000转/分,30分钟。
2、离心后的取上清0.2ml加0.855M Tris液0.2ml,混匀,置4℃30分钟,4℃离心3000
转/分,20分钟。
3 、取上清100ul 待测。
本试剂盒主要技术参数:
正常参考值:180.5 ±40.2ng/ml。
质控低值:170±20.2ng/ml。 质控高值:700±35.5ng/ml。
本月药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期:2009-05-20
有效日期:2009-06-10
生产批号:20090520
药盒厂家:Diagnostic System Laboratories USA(进口分装)
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