表皮生长因子放免药盒操作说明书
h-EGF(HY-10122) RIA KIT
人表皮细胞生长因子(h-EGF)是一种多肽激素,由50多个氨基酸组成。它刺激上皮细胞分裂,生长,还能影响各种组织和角质细胞、成纤维细胞的生长、分化;能抑制正常人胃酸的分泌。从1962年Coheh从雄鼠的颌下腺中提取出EGF以来,对EGF的生理、生化作用的研究一直在进行。现在发现EGF与癌基因的表达有关;1986年Knrobe报导胃癌病人尿中h-EGF明显高于正常人。1992年有报导,胃癌病人尿中h-EGF明显高于正常人,阳性率达41.5%;随意尿检查,阳性率高达77.8 %;手术后,尿中h-EGF含量明显降低。这提示我们,h-EGF可用于骨癌检查,以及术后随访。
药盒组成:(进口原料)
1. h-EGF抗体(冻干品) 瓶。
2. 125I - h-EGF 瓶。
3. h-EGF标准品6瓶, 其浓度为0、0.5、1、2、4、8ng/ml。
4. 免疫沉淀剂(第二抗体)1瓶。
5. 缓冲液一瓶。
样品处理:
血清及组织液可直接测定。
尿液处理:(1)收集二十四小时尿时加10ml甲苯做防腐剂,量取总量后取1ml于-20 ℃
保存,2个月内测定。(2)收集随意尿,取1ml于-20 ℃保存,2个月内测定。同时测定尿肌
酐。以上尿液测定时用生理盐水稀释100倍,然后按说明书进行操作。随意尿的测值单位以EGF
(pg)/肌酐/ml表示。
测定方法:
h-EGF RIA 操作程序 (单位:ul)
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试 剂 T NSB S0 S1~S7 样 品
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蒸 馏 水 —— 200 —— —— ——
标 准 液 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I - EGF 100 100 100 100 100
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充分混匀, 4℃ 放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 离心15分钟,去上清,测定沉淀cpm值。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,
在半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
注意事项:
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)。
本试剂盒主要技术参数:
NSB:<5%
标准曲线范围:0~8ng/ml
灵敏度:0.1ug/L
精密度:批内CV<5%,批间CV<10% 。
正常参考值:
唾液中EGF含量(X±SD): 2.19±0.61 ng/ml(n=20)
胃液中EGF含量(X±SD): 0.65±0.31 ng/ml(n=20)
随意尿EGF含量(X±SD):57.80±18.10 ng/ml(n=41)
血清中EGF含量(X±SD): 0.82±0.30 ng/ml(n=68)
血浆中EGF含量(X±SD): 0.19±0.11 ng/ml(n=35)
本月药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期:
有效日期:
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