神经降压素放免药盒操作说明书
NT（HY-10169） RIA KIT
神经降压素（Neurotensin NT）是一种首先由牛的下丘脑中提取的13个氨基酸组成的生物活性多肽，分子量1673。其后发现NT也存在人和其它哺乳动物的胃肠道中，因而是一种脑肠肽。它除了具有强烈舒血管，降血压作用外，还有显著镇痛作用等。现有研究表明，血浆和脑脊液中NT的浓度与心血管疾病、消化道疾病、神经系统疾病的发生和发展有密切联系。并有报道，某些肝癌、胰腺癌、小肠癌患者血中NT水平升高。因此，本药盒的建立，为基础医学与临床研究NT对人体的生理和病理作用机制提供了可靠手段。
测定盒的组成：
1、 缓冲液一瓶。
2、 PR分离剂（第二抗体 ）一瓶。
3、 NT 抗体一瓶。
4、 NT标记一瓶 。
5、NT标准品五瓶：20、60、180、540、1620pg/ml。
6、抑肽酶一瓶。
7、10%EDTA.Na2一瓶。
样品收集：
1、 取空腹静脉血4ml注入含10%EDTA.Na2 40ul和抑肽酶10ul（含100U/ml以上）的试管中，混匀4℃，3000rpm/ min离心10min，分离血浆（溶血样品影响测定结果）。如需要可分装2-3份保存，放-20℃可保存。测定前，使样本置于室温或冷水中复融，再次4℃，3000rpm/ min离心5min，取上清测定。
2、 组织样品的处理：取出活组织，吸去血迹，称重，尽快放入0.5mol/L醋酸 1ml略做碾磨，然后在100℃水浴中煮沸10分钟，匀浆。4℃，3000rpm/ min离心15min，取上清放-20℃以下保存，测定时用PBS稀释，以调节至PH7.4。另外，每种组织的样品非特异结合（U0）可能有差异，每份标本最单独做一个U0。取组织的重量一般在100mg左右为好。
3、 血浆样品处理：血浆0.5ml，加无水乙醇1ml，混匀，4℃ 3000rpm/ min离心10min，将上清全部移入青霉素小瓶内，放在45℃水浴锅上蒸干 大约24小时样品可以完全干燥，干燥后将青霉素瓶加盖封口，放-20℃保存。测定前每瓶加PBS0.5ml溶解，取出200ul检测。
4、 脑脊液样品：每ml脑脊液加抑肽酶500KIU，-20℃保存。
注意事项：
1、本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀本
月分离剂使用前充分混匀（不可冰冻）。
2、测兔标本时，应改用25%PEG 500ul/管 分离。同时向 NSB、S0、 S1~S5 管
加Υ球蛋白液100ul/管；U、U0管加缓冲液100ul/管。
测定方法：本实验采用非平衡法，取聚苯乙烯编号，按下表操作。
NT RIA 操作程序（单位：ul）
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 300 200 —— ——
标 准 品 —— —— —— 200 ——
样 品 —— —— —— —— 200
抗 体 —— —— 100 100 100
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摇匀，4℃ 24小时
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125I-NT 100 100 100 100 100
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摇匀，4℃ 24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温放置20分钟，3500转/分 离心25 分钟，去上清，测定各管沉淀cpm值。
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测物结合百分率,在半
对数座标纸上绘制标准曲线，并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
本试剂盒主要技术参数：
NSB：<5%
灵敏度：10pg/ml。
可测范围：20~1620 pg/ml。
精密度：批内CVW<10%，批间CVb<15% 。
特异性：本抗体与ET
、CGRP、NPY、MTL、BGP、CCK等均无交叉反应。
正常参考值：血浆提取测定：66.19±28.68 pg/ml；
血浆直接测定：74.30±30.55 pg/ml。
本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期：
有效日期；
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