促性腺激素释放激素放免药盒操作说明书
GnRH (HY-10176)RIA KIT
促性腺激素释放激素(GnRH)是调节生殖机能的下丘脑多肽激素,它能促进性的发育成熟及排卵,直接调节动情周期(动物)或月经周期(人)。本试剂盒可用于测定血浆或下丘脑等组织的GnRH 的含量。
测定盒的组成:
1、GnRH标记一瓶 。
2、GnRH抗体一瓶。
3、缓冲液一瓶。
4、免疫沉淀剂(第二抗体)一瓶。
5、GnRH标准品一瓶,用1 ml缓冲液稀释成浓度为256pg/ml,然后倍比稀释,其
浓度为 128、64、32、16、8、4pg/ml,共七管。。
样本收集和提取:
1、静脉血3ml,注入含0.5M EDTA-Na2 30ul 的试管中,混匀,离心,取血浆直接测定。
如贮于-20℃2-3个月内测定不影响结果。
2、组织的提取:取大小适宜的组织块,立即称重后于煮沸的生理盐水1ml中继续煮沸3分
钟,于加1N冰醋酸0.5ml于匀浆器中进行匀浆,再用1N NaOH 0.5m中和,离心3500转/
分,20分钟(最好是低温离心)。取上清液贮于-20℃以下待测(样本可保留2-3个月)。
测定方法:
GnRH RIA 操作程序(单位:ul)
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试 剂 T NSB S0 S1~ S7 样 品
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缓 冲 液 —— 300 200 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 200
抗 体 —— —— 100 100 100
125I- GnRH 100 100 100 100 100
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混匀, 4℃ 24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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充分混匀,室温放置15分钟后,3500转/分 离心15分钟,去上清,测定沉淀cpm值。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,
在半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
注意事项:
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术参数:
曲线范围:10~640pg/ml。
精密度:批内CV为4.1%,批间CV为 6.2% 。
准确性:回收率为93—113.0%。
抗血清特性:与性腺激素交叉反应<2.5%。
正常参考值:.正常人空腹50.1±17.2pg/ml(X±SD).
本月药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期:
有效日期;
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