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褪黑素放射免疫试剂盒操作说明书
MT (HY-10177) RIA  KIT
     褪黑素(Melatonin  MT),是松果体分泌的一种吲哚胺类激素,分子量为232.3 De, 其主要生物学作用:(1)传递光暗信号,使生物的各种内源性节律与环境周期保持同步;(2)有效清除生物体内的自由基,使机体免受氧化损伤;(3)褪黑素与钙调蛋白结合,调节细胞骨架的机能状态,以执行特定的机能;(4)具有镇痛、镇静、催眠及调节神经系统、内分泌系统、保护消化道,促进睡眠和毛皮生长的激素之一。
 
主要应用范围:
    * 抗衰老、抗癌症作用的机制研究;
        * 心脑血管、神经系统、内分泌系统疾病方面的研究;
        * 免疫功能、生物节律方面研究的参考之一;
        * 生长发育、性功能和许多器管起调节作用的指标之一。
试剂盒组成:
1、缓冲液1瓶;
1、  褪黑素标准(冻干品)2瓶;
2、 125I-褪黑素2瓶;
3、 褪黑素抗血清2瓶;
4、 分离剂1瓶;
样品收集:
吸取0.5ml血清标本(具体体积可依实际情况而定)于5ml离心管中,加入5ml二氯甲烷,振荡混匀。4℃,16000转离心10分钟后,去掉水相及脂肪层(上层)转移下层取液到5ml试管中,置通风橱中鼓风干燥或吹干。
 
测定方法:   本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
                     MT    RIA加液程序    (单位: ul )
           ————————————————————————————
              试   剂      T     NSB      B0     S1~S8      样  品
           ————————————————————————————
              缓 冲 液    ——    550      500     ——       100
              标 准 品    ——    ——    ——     500      ——
              样    品    ——    ——    ——    ——      400
              抗    体    ——    ——     50      50        50
              125I-MT            50      50     50      50        50
           ————————————————————————————
                      充分混匀,室温放置1小时,置4℃冰箱过夜。
           ————————————————————————————
              分 离 剂    ——    750     750     750       750
           ————————————————————————————
振荡混匀后,4℃冰箱放置1小时,4℃,4000 转/分 离心45 min,弃上清液,测沉淀cpm数。
结果计算:
        以N/T、B/T计算NBS、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,
    在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值。或由自动γ计数器预先编制程序,直
    接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项:
   
    本月标准品每瓶用            ml缓冲液稀释   
    本月药盒抗体每瓶用          ml缓冲液稀释
    本月药盒标记每瓶用          ml缓冲液稀释    
    本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
 
本药盒技术参数:
  
        ——————————————————————————————————————
               T     NSB      S0           S1    S2     S3       S  S5    S6    S7    s8
         ——————————————————————————————————————
         CPM
         ——————————————————————————————————————
                N/T%        B0/T%        B/ B0 %  
         ——————————————————————————————————————
 
         
      生产日期:
      有效日期:
 
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