胰岛素样生长因子结合蛋白-3免放药盒说明书
IGFBP-3(HY-10181) RIA KIT
胰岛素样生长因子结合蛋白-3(Insulin-like growth factor binding protein-3 IGFBP-3)是IGF-1主要结合蛋白.由肝脏细胞合成分泌 ,IGFBP-3是一种促凋亡因子,可竞争性与IGF-1受体结合,调节组织局部IGF-1的浓度而起作用.IGFBP-3还可不依赖IGF-1直接抑制细胞生长.新近研究表明:IGFBP-3与肿瘤的发生发展密切相关.
试剂盒组成与配制:
1、IGFBP-3标准品6瓶,其浓度分别为2、5.0、20、50、100ng/ml。
2、125I-IGFBP-3 1 瓶。3、抗IGFBP-3抗体包被管 100支。缓冲液 一瓶。
样本收集和提取:
1、 静脉血3ml,注入含0.5M EDTA-Na230ul的试管中,混匀,离心,取血浆测定。
如贮于-20℃2-3月内测定不影响结果。
2、 血清测定前标本用标本稀释液按1:100比例稀释,再进行加样.
3、 组织的提取:取大小适宜的组织块,立即称重后于煮沸的生理盐水(1ml)中煮
沸3分钟,再加1N冰醋酸0.5ml 于匀浆器中匀浆提取,再用1NNaOH 0.5ml中
和,离心3000转/分,30分钟(最好是低温离心)。取上清液贮存于-20℃以下
待测样本 可保留2-3个月。
药盒主要应用范围:
* 肿瘤的研究,尤其是血液系统的疾病的研究;
* 糖尿病,心脑血管疾病(冠状动脉硬化、脑血管疾病、脑血栓)的病理研究;
* 肝硬化,骨质疏松等方面的研究;;;
测定操作步骤:
IGFBP-3 RIA 操作程序 加样单位:ul
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试 剂 T NSB B0 S1-S8 标 本
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缓 冲 液 —— 100 —— —— ——
标 准 液 —— —— —— 100 ——
标 本 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I-IGFBP-3 100 100 100 100 100
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混匀,室温放置15分钟,离心(3500转/分)15分钟,吸弃上清液,测定各管沉淀的放射性计数(CPM)。
数据处理:
1、计算机处理:建议函数模型采用三次多项式或log~logit法。
2、计算、绘图法:
计算各管的百分结合率:以S0(cpm数)为B0,各标准管Si(cpm数)为Bi,求各管的百分结合率。
正常参考值:40.6±12.4 ng/ml
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