白细胞介素-10放免药盒操作说明书
IL-10（HY-10107）RIA KIT
白细胞介素-10（Interleulin -10, IL-10）主要是由Th2细胞产生，是能抑制Th2细胞（IFN－γ和IL－2等）释放因子的免疫调节性细胞因子。由160个氨基酸组成，分子量为18.6KD。IL－10在机体多种自身免疫疾病的产生过程中起着重要的作用，与白血病关系较为密切，IL－10在抑制内毒素休克，减轻接触性皮炎，控制类风湿关节炎的发展，减轻炎症性肺损伤中起重要作用。本试剂盒利用重组IL－10自制免抗IL－10抗血清，建立了IL－10放射免疫测定法，通过测定人体血清，体液中的IL－10水平，对疾病的临床诊断，免疫病理和免疫调节等提供了一种有价值的指标。
药盒组成：（常温运输，4℃保存）
１、 IL-10缓冲液1瓶。
２、 PR分离剂（第二抗体）1瓶
３、 IL-10标准品（冻干品）6瓶浓度为5、15、45、135、405、1215 pg/ml。
４、 IL-10抗体1瓶（冻干品）。
５、 125I - IL-101瓶（冻干品）。
样品的收集：
1、取静脉血2ml，注入试管中待凝固后，分离血清，－20℃保存2个月。测定前置室温或冷水中复融混匀，4℃3000rpm，离心5min,取上清测定。
2、组织样品处理：取出活组织，吸去血迹，称重，尽快放入生理盐水1 ml略作碾磨，然后在100℃水浴中煮沸10 min，匀浆。4℃3000 rpm，离心15min,取上清－20℃保存。另外每种组织样品非特异结合（U0）可能有差异，每份标本最好单独做U0。取组织的重量一般在400mg左右为好。
测定方法：
IL-10 RIA加液程序 （单位： ul ）
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试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品
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缓 冲 液 —— 300 200 —— ——
标 准 品 —— —— —— 200 ——
样 品 —— —— —— —— 200
抗 体 —— —— 100 100 100
125I IL-10 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放置24小时以上
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温放置15分钟后，4℃ 3500转/分 离心 15分钟 ，弃上清液，测沉淀cpm。
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率， 在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值，或由自动r计数仪预先编制程序，直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。
注意事项：
本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
主要技术指标：
1、灵敏度：<0.5pg/ml。
2、测定范围：5~1215pg/ml。
3、批内变异系数：CVw<8 %,
批间变异系数：CVw < 15% 。
4、特异性：IL-10抗血清IL－1、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、EPO、 、TNF、CT等均无交叉反应。
5、NSB＜8％。
6、正常参考值：各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
16±3.6pg/ml(n=188)。
本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期：
有效日期：
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