抗TG、TM抗体放免试剂盒操作说明书
TG、TM-Ab(HY-009) RIA KIT
临床意义:
测定人血清TG、TM抗体对桥本氏甲状腺炎、甲状腺毒症、原发性甲低症、阿狄森氏病及孕期自身免疫疾病等有重要意义。
测定原理:
本药盒利用人血清中样品TG、TM抗体与其示踪物125I-TG、125I-TM特异结合反应,形成125I-TG-Ab、或125I-TM-Ab复合物,加入羊抗人(IgG)分离剂。利用分离剂分离出复合物,并测定复合物中的放射性计数。通过数据处理可能性求出样品中TG抗体、TM抗体的浓度。
本药盒为定性测定,用血量少,直接加样,操作简便,快速。
药盒组成及配制:
1、 阴性对照血清 1瓶。使用时用0.2mL缓冲液溶解。
2、 阳性对照血清 1瓶。使用时用0.2mL缓冲液溶解。
3、 零血清 1瓶。0.5mL。
4、 125I-TG(红) 1瓶。使用时用 mL蒸馏水溶解(如不填写,100管用10mL、50管用5mL蒸馏水溶解)。
125I-TM(红) 1瓶。使用时用 mL蒸馏水溶解(如不填写,100管用10mL、50管用5mL蒸馏水溶解)。
5、缓冲液 1瓶。
6、分离剂(兰) 1~2瓶。10Ml/瓶。
以上各组份均应在使用前配制且摇匀使用。
操作方法:
1、 样品采集:取静脉血,分离血清。(2~8)℃放置可保存一周,若冰冻保存,可放置四周。脂血或溶血样品影响测定结果。未分离出血清的样品,抗体效价下降甚速。
2、 实验方法:试管编号,按下表程序操作。
操作表
管 别 |
零血清 |
阴性 对照 |
阳性 对照 |
样品 |
缓冲液 |
125I-TG
125I-TM |
混匀,37℃温育(45~60)分钟,任取三管测总T(CPM)。 |
分离剂 |
NSB管 |
10 |
-- |
-- |
-- |
500 |
100 |
100 |
阴性血清管 |
-- |
10 |
-- |
-- |
500 |
100 |
100 |
阳性血清管 |
-- |
-- |
10 |
-- |
500 |
100 |
100 |
样品管 |
-- |
-- |
-- |
10 |
500 |
100 |
100 |
混匀,室温(18~30)℃放置30分钟,离心(3500转/分)15分钟,吸弃上清液,测定各管沉淀的放射性计数(cpm)。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB,S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,
在半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
正常参考值:
TG抗体结合率<30%;
TM抗体结合率<15%。
据一些文献报道,95%的AIT患者,50%左右的甲亢患者TM抗结合率>15%,而其
它一般非自身免疫甲状腺病大多数TM抗体结合率<15%,有很大一部分原发性甲减可具
有高水平抗体,亚甲炎可出现短暂的一过性TM抗体阳性。80%左右的AIT患者,60%左
右的甲亢患者可检出TG抗体,且有患者TG抗体呈阳性,而TM抗体为阴性。
注意事项:
1、 所有试剂包括待测样品应事先在室温下平衡20分钟。
2、 对照血清溶解后,立即分装于欲测定的试管内(10цL/管),冰冻贮存。用时逐套取出,否则对照血清因溶解体积小,极易挥发。
3、 免疫分离剂宜在(2~8)℃保存,不可冰冻。使用前应充分摇匀。
4、 不同批试剂不能混合使用,每份样品都应做双管实验。
5、 本实验使用放射性核素125I(剂量为0.2 цCi/mL),故应注意放射防护,放射性废物须按放射防护条例规定处理。
生产日期:
有效日期:
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