用途:
本试剂用于测定人血清中高密度脂蛋白胆固醇的含量。
测定原理:
反应分两步进行:
1.R1中胆固醇酯酶(CEH),胆固醇氧化酶(CHOD)和过氧化氢酶(Catalase)去除乳糜颗粒(CM),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和极低密脂蛋白胆固醇(VLDL-C),其反应不显色。
2.R2中的表面活性剂释放高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),并在胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、过氧化物酶作用下发生显色反应。
试剂成分与浓度:
试 剂 |
成 分 |
实验浓度 |
R1 |
胆固醇酯酶(CEH)
胆固醇氧化酶(CHOD)过氧化氢酶(Catalase)
TOOS |
≥1000U/L
≥800U/L
≥900U/L |
R2 |
4-AA
表面活性剂
过氧化物酶(POD)
迭氮钠 |
≥4000U/L |
D-HDL-C定值血清标准 |
定值见标签 |
试剂稳定性:
原装试剂在2~8℃避光保存,有效期12个月。
样品:
样品一般采用早晨空腹血清、EDTA或肝素抗凝血浆。采血后要尽快离心分离血清或血浆(3小时内)。在室温(15~30℃)存放不得超过12小时, 2~8℃存放不得超过5天,-20℃可保存1个月,血清只能冻融1次,化冻后即须测定。
血清严重混浊时,可将血清稀释后测定。
操作步骤:
波长:546nm
反应温度:37℃
比色杯光径:1cm
试剂开瓶即可使用
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空白管 |
标准管 |
样品管 |
样品 |
— |
— |
6μl |
标准 |
— |
6μl |
— |
蒸馏水 |
6μl |
— |
— |
R1 |
600μl |
600μl |
600μl |
37℃ 5分钟 |
R2 |
200μl |
200μl |
200μl |
37℃ 5分钟,以试剂空白管校零,读A标准及A样品。
计算:
A样品
HDL-C的浓度=----------×标准浓度(mmol/L或mg/dl)
A标准
参考值:
成年男性: 1.16~1.42mmol/L (45~55mg/dl)
成年女性: 1.29~1.55mmol/L (50~60mg/dl)
合适范围:>1.04mmol/L(>40mg/dl)
减 低:<0.91mmol/L(<35mg/dl)
换算系数:mmol/L×38.67=mg/dl)
mg/dl×0.02586=mmol/L
参考文献:
《医学检验参考值手册》,主编:朱立华,1998年出版
各医院应根据本地区实际情况建立自己的正常值。
线性上限:
HDL-C浓度可达2.59mmol/L(100mg/dl)
注意事项:
1. 严格按照操作步骤分步进行操作。
2.工作液出现紫色说明试剂失效,不能使用。
3.本产品仅用于体外诊断,内含迭氮钠,应避免直接接触皮肤和眼睛,切勿吞咽。
4.标准液基质为健康人血清(HBsAg、抗HCV、抗HIV为阴性),操作与处理方法仍须与病人样品相同。
5.本产品应在2~8℃条件下贮存,避免在2~8℃以上
及0℃以下存放。