科研药盒，慎用于临床
黄嘌呤氧化酶测定试剂盒说明书
XOD(HY-60002)KIT
一、 测定意义
黄嘌呤氧化酶主要存在与哺乳动物的乳汁及肝脾中，属需要脱氢酶类，是体内核酸代谢中的重要酶，在肝细胞损伤时，此酶早于SGPT释放于血清中，并且升高明显，其对鉴别肝细胞性黄有明显的意义，并且在缺氧过程中黄嘌呤脱氢酶很快形成黄嘌呤氧化酶，其对自由基的产生起了重要的作用。
二、 测试原理：
XOD可催化次黄嘌呤生成黄嘌呤，与此同时产生超氧阴离子自由基，当有电子受体及显色剂存在的情况下，生成紫红色结合物，根据后者生成量的多少可以推算出XOD的活力。
三、试剂组成与配制(50T)
试剂一：液体，20ml，3瓶，-20℃以下保存，尽量避免反复冻溶
试剂二：液体，5ml，1瓶 4℃保存
试剂三：液体，6ml ，2瓶 4℃避光保存
试剂四：粉剂，2支，稀释液0.6ml*2支，-20℃以下保存，尽量避免反复冻溶
试剂五：60ml终止液，1瓶 4℃保存
四、 操作步骤：
1. 样本前处理：
（1） 血清（浆）的测定：血清可直接取样进行检测；血浆需以3000-3500转/分，离心10分钟，小心吸取澄清的上清进行检测。若仍有浑浊可反复离心。
（2） 红细胞的测定：抗凝全血以1000转/分，离心10分钟，弃上清，取下层红细胞加双蒸水按1：49的比例制成溶血待测，配好的溶血液最好当天做检测，4℃存放时间不超过8小时。
（3） 组织的测定：组织称重按重量/体积比加9倍的生理盐水制成10%的匀浆，2000转/分，离心10分钟取上清待测。
操作表：
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空白管 测定管
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蒸馏水ml a* --
样品ml -- b*
试剂一ml 1 1
试剂二ml 0.05 0.05
试剂三ml 0.2 0.2
试剂四ml 0.02 0.02
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混匀，37℃水浴20分钟
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试剂五ml 1.0 1.0
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混匀，530nm，1cm光径，蒸馏水调零，测各管吸光度值。
注：a*为蒸馏水量。B*为取样量，a与b在数值上相等。
五、参考取样量
血清：100ml；1：49溶血液50ml；10%肝组织匀浆25ul-100ul
六、计算公式：
1. 血清XOD活力（U/L）=（测定管OD值-空白管OD值）/呈色物摩尔消光系数×（反应液总体积/取样量）×（1/光径×反应时间）
2. 溶血液XOD活力（U/gHb）=（测定OD值-空白管OD值）/呈色物摩尔消光系数×（反应液总体积/取样量）×（1/光径×反应时间）÷血红蛋白含量（gHb/L）
3. 组织XOD活力（U/gprot）=（测定OD值-空白管OD值）/呈色物摩尔消光系数×（反应液总体积/取样量）×（1/光径×反应时间）÷匀浆蛋白含量（gprot/L）
七、注意点：
1.试剂一、试剂四放-20℃保存，尽量避免反复冻融。
2.组织块要用生理盐水漂洗后，滤纸吸干，称重后0℃以下可保存3个月以上。
3.血浆中XOD的检测：血浆在检测过程中容易引起混浊，需在测试前以3000-3500转/分，离心10分钟，小心吸取澄清的上清，弃去上层的脂肪与下层沉淀，若仍有混浊可反复离心。
生产日期：
有效日期：
生产批号：
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