多巴胺放射免疫分析药盒说明书
DA(HY-10199) RIA KIT
多巴胺(Dopamine DA)是一种单胺类的中枢神经递质,。本试剂盒利用液相竞争抑制原理,对样品进行提取,酰化再进行放免测定。待测样品或标准与限量的抗血清及标记原加在一起进行竞争性结合反应,反应完全后,加入免疫分离剂,分离出抗原-抗体复合物,测定复合物的放射性(B),计算各标准管的结合率(B/B0%)。作出标准曲线,查出样品浓度。
该药盒主要应用范围:
* 神经系统疾病的研究
* 血液流变学的研究
* 与其他激素关系的研究
试剂盒组成:
1、DA 标记一瓶; 2、DA抗体一瓶;
3、DA标准品7瓶:0;2.5; 10; 40; 160; 640; 2560ng/ml
4、提取缓冲液一瓶, 酰化缓冲液一瓶, 化验缓冲液一瓶, 提取盘一个,酰化试剂一瓶,
盐酸(0.025M)一瓶,溶解酶一瓶。
5、分离剂(第二抗体)一瓶。
标本收集:空腹抽静脉血2ml 离心取血清-20℃保存三个月。
测定方法:(整个试验操作最好在冰浴中进行,否则容易失活)
DA RIA 操作程序(单位:ul)
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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盐 酸 —— 75 —— —— ——
提取样品 —— —— —— —— 75
标 准 品 —— —— 75 75 ——
溶 解 酶 —— 25 25 25 25
抗 体 —— —— 50 50 50
125I- DA 50 50 50 50 50
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充分混匀,室温2小时后,2~8℃温育20—24小时
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免疫沉淀剂 —— 1000 1000 1000 1000
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混匀,室温放置30分钟后,3500 转/分 离心15分钟,去上清,测沉淀cpm值。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB,S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,
在半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
标本准备,提取和酰化:
1取600ul 血浆或样本加入提取盘中的小孔中,加50ul化验缓冲液,再加50ul提取缓冲液
2 室温放置振荡器上置30min后,倒出并移出多余的水。
3 取150ul酰化物于小孔中室温放置振荡器上置15min后,倒出并移出多余的水。
4 取200ul盐酸于小孔中室温放置振荡器上置10min,上清为待测液。
注意事项:
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
正常参考值:血浆小于100pg/ml.
本月药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期:
有效日期:
生产批号:
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