白细胞介素-15放免药盒操作说明书
IL-15(HY-10110)RIA KIT
白介素-15(Interleulin -15, IL-15)是一种分布于人体组织和细胞的一种细胞因子,其分子量为14 - 15KD,主要由巨噬细胞产生,它与IL-2具有相同的生物学活性。它能促进T细胞、自然杀伤细胞(N K 细胞)、B细胞增殖分化;诱导淋巴细胞产生r-干扰素和a-肿瘤坏死因子;可多方面调节T、B细胞和NK细胞分泌细胞因子;活化树突状细胞和中性粒细胞;诱导肥大细胞和骨髓细胞增殖;抑制淋巴细胞凋亡等,具有明显的促炎性反应作用;是一种重要的促炎性细胞因子, 参与许多炎性疾病的发生发展;可阻碍骨骼肌蛋白降解和抑制脂肪沉积;还可以活化增殖B淋巴细胞,并促进免疫球蛋白合成,尤其是类风湿因子(RF),在自身免疫性疾病的发病过程中具有重要作用。
药盒主要应用范围:
* 肿瘤的研究
* 造血功能和免疫功能的研究
* 肝病的研究
* 骨代谢的研究
* 肾脏疾病的研究
药盒的组成及配制:
1、IL-15: 标准品5瓶:浓度为1、2、4、8、16pg/ml。
2、125I- IL-15:2瓶。
3、抗体1瓶。
4、缓冲液 1瓶.
5、分离剂(第二抗体)1瓶。
6、标准品稀释液 1瓶。
样品收集:
取空腹静脉血2ml于试管中,凝固后分离血清,-20℃可保存二个月。
操作方法:
IL-15 RIA 操作表 单位:ul
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试 剂 T NSB S1~ S5 标本管
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缓 冲 液 —— 200 —— ——
标 准 品 —— —— 200 ——
标 本 —— —— 200 ——
抗 体 —— —— 100 100
125I- IL-15 100 100 100 100
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混匀, 4℃放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500
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混匀,室温放置20分钟,3500转/分 离心 15分钟,吸弃上清液,测沉淀cpm。
结果计算:
以N/T、B/T计算NBS、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,
在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值。或由自动γ-计数器预先编制程序,直 接
给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项:
本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
本月分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)。
标准品稀释液稀释 “0”标准品不用稀释直接使用
技术指标:
NSB:<5%
灵敏度:<2 pg/ml
曲线范围:1-16 pg/ml
批內变异系数<6%
批间变异系数<10%
特异性:本血清与IL-2、IL-6、TNF-α无交叉反应,
正常参考值: 5.99±2.01 pg/ml
各实验室应根据自己的条件建立自己的正常值:
本月药盒参考数据:
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T NSB S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期:
有效日期:
生产批号:
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