神经激肽A放免试剂盒说明书
NKA(HY-176) RIA KIT
神经激肽A(NeuroKinin,NK)是速激肽家簇的一种,是含有10个氨基酸的肽类物质,
是NANCe感觉神经肽的递质,广泛分布于中枢和周围神经系统,具有强烈迅速收缩气管平滑机的作用,又称为速激肽哮喘患者吸入NKA后,能引起剂量依赖性支气管收缩。Heaney等发现,NKA是哮喘患者支气管肺泡灌洗液(BALF)中主要的速激肽,其浓度很高,且在抗原激发后显著增高。研究结果表明,小儿哮喘发作时血浆NKA显著增加,明显高于缓解组及对照组,哮喘不同发作状态时的NKA水平也有显著差异,重度哮喘发作时的NKA水平明显高于轻、中度哮喘发作者,哮喘发作时NANC神经调节失衡,NANCe兴奋性亢进,释放NKA明显增多,而NANCi兴奋性相对减弱,其递质释放减少,因而气道阻力增加,气道痉挛加重,说明NKA参与了哮喘发病的病理生理过程,可能在哮喘发作中起重要作用,神经激肽A在免疫方面的作用引起研究者的关注,认为其具有促进细胞因子和炎症介质释放的作用,能增加血管上皮细胞黏附分子的表达并刺激人T、B淋巴细胞、单核细胞等细胞的分泌。研究发现,NKA在哮喘的发生、发展中可能起重要作用,对其进一步研究有重要临床意义。
药盒组成:
1、125I-NKA标记一瓶 。
2、NKA抗体一瓶。
3、缓冲液一瓶。
4、分离剂(第二抗体)一瓶。
5、NKA标准品6瓶:用缓冲液稀释成6.4、3.2、1.6、0.8、0.4、0.2ug/L
标本采集:
取静脉血2ml注入含10%EDTA.Na2 30ul和抑肽酶20ul的试管中,混匀4℃,3000rpm/ min离心10min,分离血浆(溶血样品影响测定结果)。如需要可分装2-3份保存,放-20℃可保存2个月。在-70℃可保存半年。测定前,使样本置于室温或冷水中复融,再次4℃,3000rpm/ min离心5min,取上清测定
操作方法:
NKA RIA KIT操作程序(单位:ul)
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试 剂 T NSB S0 S1~ S6 样 品
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
标 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
5I-NKA 100 100 100 100 100
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充分混匀,室温 温育48小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀,室温15分钟,3500 转/分 离心15分钟,去上清,测定沉淀cpm-值。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,
在半对数座标纸上绘制标准曲线,查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
注意事项:
1、本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释;
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释;
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释;
2、收到测定盒后,请放2-8℃冰箱中保存。
3分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻),标记、抗体、溶解后,直接应用,冰冻保存。标准
品溶解后,0.1ml分装,-20℃可放一月,避免反复冻融。
本试剂盒主要技术参数:
灵敏度:0.02 ug/ L
精密度:批内:CV<5%;批间CV为<10% 。
正常参考值:0.5-1.5 ug/ L
本月药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期:
有效日期:
生产批号:
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