三叶因子放免试剂盒说明书
TFF(HY-10125） RIA KI
三叶因子（trefoil factor, TFF）家族是具有一个或多个三叶因子结构域的蛋白质多肽（相对分子质量为0.7~1.8×104），三 叶因子结构域的最小共有序列为：C-X6-7-R-X2-C-G-X8-C-X4-C-C-X9-W-C (Hoffmann& Hauser, 1993)，其中的X 代表任意氨基酸残基，整个基序约38～39 个氨基酸残基。在进化上具有高度的保守性，具有耐热、耐酶消化的理化特性。。TFF 在结构上的共同点是具有一个或多个型似三叶草的三叶因子结构域（又称为P 结构域），这不仅是其理化特性的结构基础（Wong et al,1999），也是其得以命名的由来。哺乳动物的TFF 有三个成员(TFF1、TFF2 和TFF3)。黏膜组织，如胃肠道和呼吸道黏膜等是TFF 的主要合成场所。生理条件下，TFF 的分布具有组织专一性，具有黏膜保护和创伤修复作用。TFF 在肿瘤组织中广泛表达，在肿瘤的发生、发展、侵袭、转移过程中发挥着重要作用，可能是癌基因在对不同刺激做出反应时的共有递质。TFF 生物学功能存在一个复杂的调控过程，单链TFF 可通过膜受体而激活相关信号通路，TFF 也可以通过与其它蛋白质的结合而协同发挥作用。TFF 在临床医学领域主要运用在黏膜保护、黏膜损伤相关疾病的预防和治疗及肿瘤病理的诊断与干预等方面。TFF 的作用机制和功能行使相关信号通路仍然是目前研究的重点，TFF 与βγ-晶状体蛋白天然复合物的发现有助于对TFF 的进一步认识和深入研究。因此, TFF的研究进展及其临床应用一直受到了国内医学研究者的关注.近年来, 作为一个潜在的生物学标志物, TFF在消化系统疾病和肿瘤疾病的实验诊断学应用研究方面的进展.
药盒组成：
1、TFF标准品五瓶：10、30、90、270、810 pmol/L
2、TFF标记一瓶 。
3、TFF抗体一瓶。
4、免疫分离剂（第二抗体）一瓶。
标本采集：取晨空腹的静脉血，离心，取血清，备检或放-25℃保存。
操作步骤：
TFF RIA 操作程序（单位：ul）
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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蒸 馏 水 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— 100 100 ——
血 样 —— —— —— —— 100
125I- TFF 100 100 100 100 100
抗 血 清 —— —— 100 100 100
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充分混匀，2-4℃ 温育 24小时
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分 离 剂 —— 1000 1000 1000 1000
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混匀，室温放置15分钟， 3500转/分离心15分钟，弃上清，测沉淀CPM。方法
数据处理：
1、 计算机处理：建议函数模型采用三次多项式或log～logit法。
2、 计算、绘图法：
计算各管的百分结合率：以S0（cpm数）为B0，各标准管Si（cpm数）为Bi，求各管的百分结合率。
Bi Bi管（cpm）— NSB管（cpm）
— %= —————————————— ×100
B0 B0管（cpm）— NSB管（cpm）
（1）线性回归：用logX～logitY回归，求出r、a、b值，样品含量可由下式计算得出。
- a +logit Y
Log X= ————
b
（2）绘图法：用各标准点计算的结果，在log～logit坐标纸上绘制标准曲线图，未知样品浓度可根据Bi/B0的百分结合率从标准曲线图上查出。
正常叁考值：
各实验室应建立自己的正常值，下列正常参考值仅供参考：
80pmol/L – 240pmol/L
技术特性：
1、曲线范围： 10pmol/L -810pmol/L
2、灵敏度： < 1pmol/L
3、特异性：TFF抗血清与类似抗原交叉反应合格。
4、精密度：批内CVw<5%，批间CVb<10%
保存及有效期：
药盒于（2～8）℃避光保存，切勿冻存。自检定合格之日起有效期为45天。
药盒参考数据：
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指标 |
B/T（%） |
Bi/B0(%) |
|
项目 |
NSB |
S0 |
S1 |
S末 |
|
参数 |
<5 |
≥40 |
90 |
8 |
生产日期：2011-03-03
有效日期：2011-04-02
生产批号：201103003
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