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                             肌肉生长抑制素放免操作说明书
MyostatinHY-D0047 RIA  KIT
      肌肉生长抑制素( MSTN, Myostatin) , 又称GDF-8(growth differentiation facyor-8)。属于转化生长因子超家族, Myostatin 具有和其他TGF-β超基因家族成员共同的特征:N-端有一段信号肽序列B可籍以跨过内质网(2)紧挨着生物活性区由4个氨基酸(RSRR)组成的蛋白酶加工位点(3)C-末端包含9个保守的半胱氨酸的生物活性区,靠分子间,的二硫键形成二聚体。其作用特征是在骨骼肌中中特异性表达,对肌肉生长有负调控作用,该基因突变可导致骨骼肌肥大,因此也称为肌肉生长抑制素(myo.statin)。大量实验证明肌肉生长抑制素参与了骨骼肌疾病的发生,是影响骨骼肌生长发育的重要候选基因之一。最新研究发现,力量训练能降低肌肉生长抑制素的表达,其基因多态性可能与人的运动能力相关联。因此关于肌肉生长抑制素的研究,将有助于人们探索运动对骨骼肌的影响机制,肌萎缩、肌肉营养不良等疾病的发生机制,为运动康复和运动治疗提供新的途径;现有研究显示MST N 抑制剂可用来作为防止或治疗代谢紊乱症如肥胖和二型糖尿病。
 
标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。
 
该药盒主要应用范围:
    *肥胖症研究及疗效监测
   * 糖尿病的研究
   *肌萎缩、肌肉营养不良等疾病的发生机制
  
药盒组成:(常温运输,4℃保存)
1.  Mstn缓冲液1瓶
2.  Mstn(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。
3.  Mstn标准品7瓶。浓度为0、2、5、10、20、40、80 ng/mL
4.  Mstn抗体1瓶。
5.  125I - mstn 1瓶  
     测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
                      Mstn加液程序    (单位: ul )
           ————————————————————————————
              试   剂      T     NSB      S0     S1~S5      样  品
           ————————————————————————————
              缓 冲 液    ——    200     100     ——      ——
              标 准 品    ——    ——    ——    100       ——
              样    品    ——    ——    ——    ——      100
              抗    体    ——    ——    100     100       100
              125I-Mstn      100     100     100     100       100
           ————————————————————————————
                             摇匀4℃ 放置24小时
    
 
      ————————————————————————————
              分 离 剂    ——   500      500     500       500
           ————————————————————————————
混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。
 
  结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项:  
      本月标准品每瓶用   0.5       ml 缓冲液稀释
      本月药盒抗体每瓶用           ml 缓冲液稀释    
      本月药盒标记每瓶用           ml 缓冲液稀释  
      本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
   本试剂盒主要技术指标:
1、  NSB:<5%。
2、  灵敏度:<100pg/ml。
3、  标准曲线范围:0-400ug/L
4、  批内变异系数:CVw<7.2%;
      批间变异系数:CVw < 10% 。
5、  正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
                 7.93±2.35ng/ml
     本月药盒参考数据:
    —————————————————————————————————————————
           T       NSB       S0           S1        S2          S3         S4         S5    
    —————————————————————————————————————————
    CPM
    —————————————————————————————————————————
             N/T%          B0/T%        B/ B0 %  
    —————————————————————————————————————————
    
生产日期:
有效日期:
生产批号:
  
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