脂肪炎症因子放免药盒操作说明书
Apelin(HY-100) RIA KIT
脂肪炎症因子(Apelin)是Tatemoto等于1998年首次通过反向药理学方法从牛胃的分泌物中提取并纯化的APJ的天然配体,也是由脂肪细胞分泌的一种新的脂肪细胞因子。O’Dowd等于1993年通过同源性克隆方法发现了APJ受体,即血管紧张素受体1相关的受体蛋白。Apelin是近年新发现的心血管活性肽⋯,是孤儿G蛋白偶联受体的内源性配体,广泛存在于心血管组织中,Apelin具有扩张血管、降低血压和正性肌力作用,并可能通过旁分泌和(或)自分泌方式参于心血管疾病的病理生理调节作用。apelin-APJ系统具有调节血压和体液平衡、正性肌力、改善胰岛素的敏感性等多种生物学效应.从而在心血管疾病和代谢综合征等方面发挥着重要的作用。根据免疫竞争原理,用非平衡法建立了直接检测血清Apelin水平的放射免疫分析方法。
药盒主要应用范围:
* 心血管疾病的研究
* 糖尿病研究
* 肥胖症的研究
药盒组成:(常温运输,4℃保存)
1. Apelin缓冲液1瓶
2. Apelin(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。
3. Apelin标准品5瓶,浓度为0、10、20、50、100、200、400 ng/mL
4. Apelin抗体1瓶。
5. 125I - Apelin 1瓶
标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。
测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
Apelin RIA加液程序 (单位: ul )
————————————————————————————
试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
————————————————————————————
缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I-Apelin 100 100 100 100 100
————————————————————————————
摇匀4℃ 放置24小时
————————————————————————————
分 离 剂 —— 500 500 500 500
————————————————————————————
混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项:
本月标准品每瓶用 0.5 ml 缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 10 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 10.5ml ml缓冲液溶解
本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术指标:
1、 NSB:<5%。
2、 灵敏度:<100pg/ml。
3、 标准曲线范围:0-400ug/L
4、 批内变异系数:CVw<7.2%;
批间变异系数:CVw < 10% 。
5、 正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
44.44±9.20 ng/mL
本月药盒参考数据:
—————————————————————————————————————————
T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
—————————————————————————————————————————
CPM
—————————————————————————————————————————
N/T% B0/T% B/ B0 %
—————————————————————————————————————————
生产日期:
有效日期:
生产批号:
地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业园东区1号楼12层12A
北京华英生物技术研究所
免费电话:8008109828
邮 编: 100085
电 话:(010)88114651 (010) 56146198
传 真:(010)88112680
网址:www.sinoukbio.com
E-Mail:sinouk@163.com
QQ客服:1749417768