脂肪中激素敏感脂肪酶放免药盒操作说明书
HSL（HY-10078） RIA KIT
动物体内脂肪代谢始终处于动态平衡之中，甘油三酯合成和分解的状态及速率均会影响体内脂肪的积累。由于催化甘油三酯水解的限速酶的活性受激素的控制，故将此酶称为激素敏感脂肪酶（HSL）。激素敏感脂肪酶(hormone—sensitive lipase，HSL)是动物脂肪分解代谢的限速酶。它通过催化水解储存在脂肪组织中的甘油三酯释放出游离的脂肪酸，以满足机体的能量需要。HSL主要在动物的白色脂肪组织中表达，同时也在肝、骨骼肌、睾丸等组织中有少量的表达。它的活性受体内多种激素调控。在机体正常的生理条件下，HSL发挥着较多的功能，如影响脂肪的代谢、类固醇的合成、精子的生成、胰岛素的分泌等。HSL表达异常或HSL基因(hsZ)多态性与人类代谢性疾病如肥胖、胰岛素抵抗、二型糖尿病和高脂血症等之间关系的研究目前已经取得一些进展
标本的收集：空腹抽静脉血2ml离心取血清，-20℃保存三个月。
药盒主要应用范围：
* 心血管疾病的研究
* 糖尿病研究
* 肥胖症的研究
药盒组成：（常温运输，4℃保存）
1．HSL缓冲液1瓶
2．HSL（第二抗体）1瓶，用前充分摇匀。
3．HSL标准品7瓶，浓度为0、25、50、100、200、400、800 U/L
4．HSL抗体 1瓶。
5．125I –HSL 1瓶
测定方法：本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：
HSL RIA加液程序 （单位： ul ）
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I-HSL 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温放置15分钟后，3500 转/分 4℃离心20 min，弃上清液，测沉淀cpm数。
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值，或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。
注意事项：
本月标准品每瓶用 0.5 ml 缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 10 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 10.5ml ml缓冲液溶解
本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
本试剂盒主要技术指标：
1、NSB：<5%。
2、灵敏度：<100pg/ml。
3、标准曲线范围：0-400ug/L
4、批内变异系数：CVw<7.2%；
批间变异系数：CVw < 10% 。
5、正常参考值：各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
70.21±22.50 U/L
本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期：2011-08-15
有效日期：2011-09-15
生产批号：2011-0815
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