强啡肽放免药盒操作说明书 Dynorphin(HY-10186) RIA KIT
强啡肽(Dynorphin Dyn)十三肽,存在于脑、十二指肠、垂体,具有很强的阿片样活性,其N端的5个氨基酸序列与脑啡肽相同。其前体是强啡肽原,含236个氨基酸残基,是由前强啡肽原经过加工形成的。强啡肽是一种阿片肽,生理功能多种多样,最早被人们认识到的是其显著的镇痛功能,但其对人体具有很强的成瘾性和药物依赖性,阿片肽和阿片受体在体内广泛分布,长期以来人们一直认为阿片肽是一种中枢神经肽或神经递质,仅在中枢神经系统发挥作用,以后又发现它对机体的很多功能有明显的调节作用,如对心血管系统、呼吸系统等 。 药盒组成: 1、125I-Dyn(冻干品) 1 瓶。 2、Dyn(冻干品)1 瓶 3、标准Dyn(冻干品) 1瓶,用 ml倍比稀释 4、分离剂(第二抗体)一瓶。 5、缓冲液1瓶。 实验步骤: 1、血清(或血浆)标本直接测定 2、取组织,立即称重后加到1ml 100℃生理盐水中煮沸5分钟后迅速冷却,再加0.5ml 1N醋酸制成匀浆,置4℃ 1-2小时后离心2000 G 15分钟,取上清,冷冻干燥后用RIA缓冲液复溶,进行RIA测定。或煮沸迅速冷却后用0.1N盐酸制成匀浆,置4℃1-2小时后再用0.1N NaOH中和,离心取上清液-20℃保存待测。 3、脑激液标本直接离心 4、测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作 Dyn RIA 加样程序 单位: ───────────────────────────── 试 剂 T NSB S0 S1—S7 标 本 ───────────────────────────── 缓 冲 液 —— 200 100 —— —— EP 标 准 —— —— —— 100 —— 标 本 —— —— —— —— 100 125I-Dyn 100 100 100 100 100 抗 体 —— —— 100 100 100 ───────────────────────────── 4℃ 放置24小时 ───────────────────────────── 分 离 剂 500 500 500 500 500 ───────────────────────────── 振荡3分钟,3000转/分 离心 15分钟,弃上清,测沉淀计数cpm。
结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率, 在半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
注意事项: 本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术指标: 1、 NSB:<5%。 2、灵敏度:<20 Pg/ml。 3、批内变异系数:CVw<5.50 %。 4、批间变异系数:CVw < 9.10% 。 5、正常参考值:151±16.6 Pg/ml (各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组)
本月药盒参考数据: ————————————————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 ————————————————————————————————————————— CPM ————————————————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % ————————————————————————————————————————— 生产日期: 有效日期: 生产批号:
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