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                          强啡肽放免药盒操作说明书
                          Dynorphin
HY-10186 RIA  KIT

     强啡肽(Dynorphin  Dyn)十三肽,存在于脑、十二指肠、垂体,具有很强的阿片样活性,其N端的5个氨基酸序列与脑啡肽相同。其前体是强啡肽原,含236个氨基酸残基,是由前强啡肽原经过加工形成的。强啡肽是一种阿片肽,生理功能多种多样,最早被人们认识到的是其显著的镇痛功能,但其对人体具有很强的成瘾性和药物依赖性,阿片肽和阿片受体在体内广泛分布,长期以来人们一直认为阿片肽是一种中枢神经肽或神经递质,仅在中枢神经系统发挥作用,以后又发现它对机体的很多功能有明显的调节作用,如对心血管系统、呼吸系统等 。
药盒组成:
1、125I-Dyn(冻干品) 1 瓶。
2、Dyn(冻干品)1 瓶
3、标准Dyn(冻干品) 1瓶,用   ml倍比稀释
     4、分离剂(第二抗体)一瓶。
     5、缓冲液1瓶。
实验步骤:
1、血清(或血浆)标本直接测定 
2、取组织,立即称重后加到1ml 100℃生理盐水中煮沸5分钟后迅速冷却,再加0.5ml 1N醋酸制成匀浆,置4℃ 1-2小时后离心2000 G 15分钟,取上清,冷冻干燥后用RIA缓冲液复溶,进行RIA测定。或煮沸迅速冷却后用0.1N盐酸制成匀浆,置4℃1-2小时后再用0.1N NaOH中和,离心取上清液-20℃保存待测。
3、脑激液标本直接离心
4、测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作
                        Dyn  RIA  加样程序         单位:
            ─────────────────────────────
                试  剂      T      NSB      S0       S1—S7      标 本        
            ─────────────────────────────
               缓 冲 液    ——      200     100      ——        ——   
               EP 标 准    ——      ——      ——      100        —— 
               标    本    ——      ——      ——      ——        100     
               125I-Dyn     100       100     100      100        100  
               抗    体    ——      ——      100      100        100         
            ─────────────────────────────
                             4℃   放置24小时
            ─────────────────────────────
              分 离 剂     500     500     500      500       500 
            ─────────────────────────────
           振荡3分钟,3000转/分 离心 15分钟,弃上清,测沉淀计数cpm。

结果计算:
      以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,
 在半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。

    注意事项:
     本月标准品每瓶用            ml缓冲液稀释 
     本月药盒抗体每瓶用          ml缓冲液稀释 
         本月药盒标记每瓶用           ml缓冲液稀释    
     本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)

  本试剂盒主要技术指标:
1、 NSB:<5%。
2、灵敏度:<20 Pg/ml。
3、批内变异系数:CVw<5.50 %。
4、批间变异系数:CVw < 9.10% 。
5、正常参考值:151±16.6 Pg/ml
(各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组)

    本月药盒参考数据:
    —————————————————————————————————————————
           T       NSB       S0          S1     S2       S3     S4      S5     S6     S7
    —————————————————————————————————————————
         CPM
    —————————————————————————————————————————
             N/T%          B0/T%        B/ B0 %  
    —————————————————————————————————————————
 
生产日期:
有效日期:
生产批号:

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