解偶联蛋白3放免药盒操作说明书
UCP-3(HY-10209) RIA KIT 目前已发现5 种不同的UCPs 家族成员,分别为UCP1、UCP2、UCP3、UCP4、和UCP5/ BMCP1。UCPs 的共同特征是其单体由大约300 个氨基酸组成,每个单体均具有6 个穿膜结构域,UCPs 只有二聚体才有转运功能,UCPs 家族每个成员均有3 个由100 个氨基酸组成的重复序列。在上述几种解偶联蛋白中,由于UCP3 主要分布在骨骼肌中,与运动关系密切。通过对人类骨骼肌cDNA 文库筛选,Boss 等发现了两条RNA 转录产物,由于其与UCP1 的高度同源性,从而命名为UCP3 (在同一年的早些时候已经发现了UCP2) ,UCP3 根据其氨基酸的长度不同,分为长链UCP3 (UCP3L) 和短链UCP3 (UCP3S) 。Solanes 等确定了其在染色体上的位置及基本结构,UCP3 由7 个外显子构成,长度为8. 5 kb 左右,位于11 号染色体的长臂(11q13) ,与UCP2 相邻。
药盒组成:(常温运输,4℃保存) 71. UCP-3缓冲液1瓶 72. UCP-3(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。 73. UCP-3标准品7瓶,浓度为0.25、0.5、1、2、5pg/mL 74. UCP-3抗体 1瓶。 75. 125I –UCP-3 1瓶 测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作: UCP-3 RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 200 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I- UCP-3 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放置24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。
结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。 注意事项: 本月标准品每瓶用 0.5 ml 缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 10 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 10.5ml ml缓冲液溶解 本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻) 本试剂盒主要技术指标: 72、 NSB:<5%。 73、 灵敏度:<100pg/ml。 74、 标准曲线范围:0-4000ng/L 75、 批内变异系数:CVw<7.4%; 批间变异系数:CVw < 10% 。 76、 正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 1.26±0.47 pg/mL 本月药盒参考数据: ————————————————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 ————————————————————————————————————————— CPM ————————————————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % —————————————————————————————————————————
生产日期: 有效日期: 生产批号: 试剂厂家:北京华英生物技术研究所(本药盒抗原抗体由SIGMA-ALDRICH公司购买)
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