基质细胞生长因子放免试剂盒说明书
SDF(HY-10130) RIA KIT
基质细胞衍生因子(Stromal Cell-derived Factor-1,SDF-1)是由骨髓基质细胞及其相关的间皮细胞和上皮细胞持续分泌的一种趋化蛋白,系统命名为CXCL12 ,是骨髓造血微环境的重要组成部分。基质细胞衍生因子既参与了正常造血干祖细胞的回髓、定位、增殖,同时还可能与恶性系统血液肿瘤发生时的肿瘤细胞迁移、浸润、增殖甚至抗凋亡作用相关。有报道血清SDF-1的表达水平上调出现于多种血液系统恶性肿瘤中,而在出现明显的浸润的肿瘤病例中,这种上调更为显著。
标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。
该药盒主要应用范围:
* 肿瘤疾病的研究
* 血液病的研究;
药盒组成:(常温运输,4℃保存)
1. SDF-1缓冲液1瓶
2. SDF-1(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。
3. SDF-1标准品5瓶,浓度为0.3、0.9、2.7、8.1、24.3 ng/mL
4. SDF-1抗体 1瓶。
5. 125I –SDF-1 1瓶
测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
SDF-1 RIA加液程序 (单位: ul )
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I- BMP-7 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项:
本月标准品每瓶用 0.5 ml 缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 10.5 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 10.5 ml缓冲液溶解
本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术指标:
1、 NSB:<5%。
2、 灵敏度:<0.03 ng/ml。
3、 标准曲线范围:0.3-24.3ng/ml
4、 批内变异系数:CVw<7.3%;
批间变异系数:CVw < 10% 。
5、 正常参考值:1.15ng/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
本月药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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生产日期:
有效日期:
生产批号:
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