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                                        环氧合酶2放免试剂盒说明书

                                               COX-2(HY-10207) RIA  KIT

      环氧合酶2(Cycloxygenase,COX2),又名前列腺素过氧化物合成酶,是花生四烯酸代谢的关键限速酶。COX有2个同分异构体,即结构型(COX-1)和诱生型(COX-2)。人类COX-2基因位于染色体1q25.2-25.3上,含有10个外显子和9个内含子,其mRNA表达产物为4.5KB的蛋白质。正常情况下,COX-2基因不表达。但COX-2在有丝分裂原刺激下可大量表达,COX-2主要分布于核膜。近年研究表明,COX-2除参与炎症反应外,其过度表达与多种上皮性肿瘤发生发展关系密切,并可作为预防和治疗肿瘤的靶分子,因而具有重要的临床意义。
药盒主要应用范围:
*各种肿瘤疾病          
药盒组成:(常温运输,4℃保存)
1. COX-2缓冲液1瓶
2. COX-2(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。
3. COX-2标准品5瓶,浓度为5、10、20、40、80 U/L
4. COX-2抗体 1瓶。
5. 125I –COX-2 1瓶  
标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。
测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
                       MMP-13  RIA加液程序    (单位: ul )
           ————————————————————————————
              试   剂      T     NSB      S0     S1~S5      样  品
           ————————————————————————————
              缓 冲 液    ——    200     100     ——      ——
              标 准 品    ——    ——    ——    100       ——
              样    品    ——    ——    ——    ——      100
              抗    体    ——    ——    100     100       100
         125I- COX-2   100     100     100     100       100
           ————————————————————————————
                             摇匀4℃ 放置24小时
           ————————————————————————————
              分 离 剂    ——   500      500     500       500
           ————————————————————————————
混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。

结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项:  
      本月标准品每瓶用           ml 缓冲液稀释
      本月药盒抗体每瓶用         ml缓冲液稀释
      本月药盒标记每瓶用         ml缓冲液溶解
      本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术指标:
1、 NSB:<5%。
2、 灵敏度:<1 IU/L。
3、 标准曲线范围:5-80U/L
4、 批内变异系数:CVw<7.3%;
      批间变异系数:CVw < 10% 。
5、 正常参考值:5-11 U/L各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
                
     本月药盒参考数据:
    —————————————————————————————————————————
           T       NSB       S0           S1        S2          S3         S4         S5    
    —————————————————————————————————————————
    CPM
    —————————————————————————————————————————
             N/T%          B0/T%        B/ B0 %  
    —————————————————————————————————————————

     
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