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                           二肽基肽酶放免试剂盒说明书 

                                DDP-4(HY-10220) RIA  KIT
  
     二肽基肽酶(DPP-4,Dipeptidyl peptidase 4)又被称为T细胞表面抗原CD26。亦称ADABP,ADCP2,DPPIV,TP103,二肽基肽酶4,二肽基肽酶IV,T细胞活化抗原CD26的,腺苷脱氨酶络合蛋白2。是一种细胞表面的丝氨酸蛋白酶。DPP-4在肠中高表达,此外于肝脏、胰腺、胎盘、胸腺等也有表达,部分以可溶形式存在于循环血液中。可溶性的DPP-4具有酶活性,其主要作用是优先将氨基末端第2个氨基酸为丙氨酸(Ala)或脯氨酸(Pro)的寡肽的氨基末端前两个氨基酸剪切去除。DPP4是一种体内的酶,也就是酵素。它主要的作用是在分解体内的蛋白质,其中一种被DPP4分解的蛋白质叫做GLP─1,它是由肠道细胞分泌的荷尔蒙,GLP-1可以通过可以刺激胰岛素、抑制升糖素、抑制胃排空和让胰岛细胞重生的方式来降低血糖。目前导致DPP4失活从而不分解GLP-1的DPP4抑制剂已经成为治疗糖尿病的主攻方向之一。
药盒主要应用范围:
*  糖尿病的研究
药盒组成:(常温运输,4℃保存)
1. DDP-4缓冲液1瓶
2. DDP-4(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。
3. DDP-4标准品5瓶,浓度为5、10、20、40、80、160 ng/mL
4. DDP-4抗体 1瓶。
5. 125I –DDP-4 1瓶   
标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。
测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
                       DDP-4  RIA加液程序    (单位: ul )
           ————————————————————————————
              试   剂      T     NSB      S0     S1~S5      样  品
           ————————————————————————————
              缓 冲 液    ——    200     100     ——      ——
              标 准 品    ——    ——    ——    100       ——
              样    品     ——    ——    ——    ——      100
              抗    体     ——    ——    100     100       100
         125I- DDP-4   100     100     100     100       100
           ————————————————————————————
                             摇匀4℃ 放置24小时
           ————————————————————————————
              分 离 剂    ——   500      500     500       500
   
          ————————————————————————————
    混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。
结果计算
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项:  
      本月标准品每瓶用           ml 缓冲液稀释
      本月药盒抗体每瓶用         ml缓冲液稀释
      本月药盒标记每瓶用         ml缓冲液溶解
      本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术指标
1、 NSB:<5%。
2、 灵敏度:<0.5 ng/ml。
3、 标准曲线范围:5-160ng/ml
4、 批内变异系数:CVw<7.3%;
      批间变异系数:CVw < 10% 。
5、 正常参考值:7.1 ng/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
                 
本月药盒参考数据:
    —————————————————————————————————————————
           T       NSB       S0           S1        S2          S3         S4         S5    
    —————————————————————————————————————————
    CPM
    —————————————————————————————————————————
             N/T%          B0/T%        B/ B0 %  
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