二肽基肽酶放免试剂盒说明书
DDP-4(HY-10220) RIA KIT 二肽基肽酶(DPP-4,Dipeptidyl peptidase 4)又被称为T细胞表面抗原CD26。亦称ADABP,ADCP2,DPPIV,TP103,二肽基肽酶4,二肽基肽酶IV,T细胞活化抗原CD26的,腺苷脱氨酶络合蛋白2。是一种细胞表面的丝氨酸蛋白酶。DPP-4在肠中高表达,此外于肝脏、胰腺、胎盘、胸腺等也有表达,部分以可溶形式存在于循环血液中。可溶性的DPP-4具有酶活性,其主要作用是优先将氨基末端第2个氨基酸为丙氨酸(Ala)或脯氨酸(Pro)的寡肽的氨基末端前两个氨基酸剪切去除。DPP4是一种体内的酶,也就是酵素。它主要的作用是在分解体内的蛋白质,其中一种被DPP4分解的蛋白质叫做GLP─1,它是由肠道细胞分泌的荷尔蒙,GLP-1可以通过可以刺激胰岛素、抑制升糖素、抑制胃排空和让胰岛细胞重生的方式来降低血糖。目前导致DPP4失活从而不分解GLP-1的DPP4抑制剂已经成为治疗糖尿病的主攻方向之一。 药盒主要应用范围: * 糖尿病的研究 药盒组成:(常温运输,4℃保存) 1. DDP-4缓冲液1瓶 2. DDP-4(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。 3. DDP-4标准品5瓶,浓度为5、10、20、40、80、160 ng/mL 4. DDP-4抗体 1瓶。 5. 125I –DDP-4 1瓶 标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。 测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作: DDP-4 RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 200 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I- DDP-4 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放置24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。 结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。 注意事项: 本月标准品每瓶用 ml 缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液溶解 本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻) 本试剂盒主要技术指标: 1、 NSB:<5%。 2、 灵敏度:<0.5 ng/ml。 3、 标准曲线范围:5-160ng/ml 4、 批内变异系数:CVw<7.3%; 批间变异系数:CVw < 10% 。 5、 正常参考值:7.1 ng/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 本月药盒参考数据: ————————————————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 ————————————————————————————————————————— CPM ————————————————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % —————————————————————————————————————————
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