血栓调节蛋白放免试剂盒说明书
TM（HY-10215)RIA KIT
血栓调节蛋白（thrombomodulin, TM）为一单链多节段跨膜糖蛋白，相对分子量75000，降解二硫键后相对分子量为105 000，其二级结构中含有多个丝氨酸，这种二级机构使TM在内环境变化时具有稳定性。人体组织中除中枢神经系统外，所有的血管及淋巴管内皮细胞都可表达TM。TM有两种存在形式：固定型（膜型）和溶解型（血液型），前者存在于细胞表面，后者游离于血浆和尿液中。凝血酶与内皮细胞上的高黏附性受体结合，可使蛋白C（PC）快速活化，并导致凝血酶底物发生特异性改变，这种凝血酶受体被命名为血栓调节蛋白，又称凝血酶调节蛋白。。作为内皮细胞表面一种具有很强抗凝活性的糖蛋白，TM不仅是重要的抗凝辅助因子，也是反映血管内皮细胞损伤的分子标志，多种累及血管内皮损伤的疾病，如系统性红斑狼疮、糖尿病、肾小球疾病、风湿性关节炎、系统性硬化症，弥漫性血管内凝血（DIC）和白血病等，TM都有增高。
标本的收集：空腹抽静脉血2ml离心取血清，-20℃保存三个月。
药盒主要应用范围：
* 血管内皮损伤疾病；
* 糖尿病的研究；
* 血液疾病的研究；
药盒组成：（常温运输，4℃保存）
1． TM缓冲液1瓶
2． TM（第二抗体）1瓶，用前充分摇匀。
3． TM标准品5瓶，浓度为0.5、1.5、4.5、13.5、40.5ug/L
4． TM抗体 1瓶。
5． 125I –TM 1瓶
测定方法：本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：
TM RIA加液程序 （单位： ul ）
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I- TM 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温放置15分钟后，3500 转/分 4℃离心20 min，弃上清液，测沉淀cpm数。
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值，或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。
注意事项：
本月标准品每瓶用 0.5 ml 缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 10.5 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 10.5 ml缓冲液溶解
本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
本试剂盒主要技术指标：
1、 NSB：<5%。
2、 灵敏度：<0.05 ug/L。
3、 标准曲线范围：0.5-40.5ug/L
4、 批内变异系数：CVw<7.3%；
批间变异系数：CVw < 10% 。
5、 正常参考值：1.64ug/L各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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