花生四烯酸放免药盒操作说明书
AA（HY-10085） RIA KIT
花生四烯酸(Arachidonic Acid简称AA)，化学名称为5，8，1 l，14_二十碳四烯酸，是人体中含量最高分布最广泛的多不饱和必需的脂肪酸。它在生物体内主要以磷脂的形式存在于细胞膜上。游离的从在正常生理状态下水平很低，正常人血清中游离的从约为0．05’0．5 11 mol／L，但当细胞膜受到各种刺激时，AA在磷脂酶A2的催化下从磷脂池中释放出来，转化成具有生物活性的二十碳衍本药盒利用放射免疫分析方法进行测定。在均相竞争抑制反应中采用平衡法，用免疫分离剂分离出抗原—抗血清复合物，并测定复合物中放射性计数。125I-AA的结合量与样品中AA的浓度呈函数关系，通过数据处理可求出样品中AA的含量。
药盒组成：（常温运输，4℃保存）
1． AA缓冲液1瓶
2． AA（第二抗体）1瓶，用前充分摇匀。
3． AA标准品7瓶，浓度为0、5、10、20、40、80、160ug/mL
4． AA抗体 1瓶。
5． 125I –AA 1瓶
标本的收集：空腹抽静脉血2ml离心取血清，-20℃保存三个月。
测定方法：本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：
AA RIA加液程序 （单位： ul ）
————————————————————————————
试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
————————————————————————————
缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I- AA 100 100 100 100 100
————————————————————————————
摇匀4℃ 放置24小时
————————————————————————————
分 离 剂 —— 500 500 500 500
————————————————————————————
混匀，室温放置15分钟后，3500 转/分 4℃离心20 min，弃上清液，测沉淀cpm数。
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值，或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。
注意事项：
本月标准品每瓶用 0.5 ml 缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 10 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 10.5ml ml缓冲液溶解
本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
本试剂盒主要技术指标：
1、 NSB：<5%。
2、 灵敏度：<100pg/ml。
3、 标准曲线范围：0-4000ng/L
4、 批内变异系数：CVw<7.1%；
批间变异系数：CVw < 10% 。
5、 正常参考值：各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
17.16士4.07 ug/mL
本月药盒参考数据：
—————————————————————————————————————————
T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
—————————————————————————————————————————
CPM
—————————————————————————————————————————
N/T% B0/T% B/ B0 %
—————————————————————————————————————————
地址：北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业园东区1号楼12层12A
北京华英生物技术研究所
免费电话：8008109828
邮 编： 100085
电 话：（010）88114651 (010) 56146198
传 真：（010）88112680
网址：www.sinoukbio.com
E-Mail:sinouk@163.com
QQ客服：1749417768
|
