晚期糖基化终末产物放免药盒操作说明书
AGEs（HY-076） RIA KIT
AGEs是以蛋白质、脂肪及核酸的氨基和还原糖(葡萄糖、果糖、戊糖等)为原料，在生理环境中发生非酶催化反应，生成的稳定的共价化合物。该反应又称为Maillard反应。AGEs在体内的积聚引发糖尿病的各种并发症。血管的基质成分胶原蛋白糖基化并交联；LDL与AGEs形成AGEs—LDL后，LDL的清除受障碍，体内脂质增加；内皮下单核细胞受体与AGEs结合，单核细胞分泌细胞因子都会增加血管粥样硬化发生的机会。正常情况下，单核巨噬系统通过内吞方式清除作为衰老标志的糖基化结构并分泌细胞因子刺激新基质合成，糖尿病及肾衰时，体内AGEs含量极高，生长因子的分泌过度，就会造成血管增生、系膜增生、肾小球肥大；系膜细胞在摄取和降解AGEs的同时会合成和分泌基质成分，AGEs含量过高时基质成分过度增加，这些都与糖尿病肾病的发生相关。故AGEs的研究对糖尿病肾病的研究和治疗有着重要的意义。
药盒主要应用范围：
* 肾病的研究
* 糖尿病的研究
标本的收集：空腹抽静脉血2ml离心取血清，-20℃保存三个月。
药盒组成：（常温运输，4℃保存）
1． AGES缓冲液1瓶
2． AGES（第二抗体）1瓶，用前充分摇匀。
3． AGES标准品7瓶，浓度为10、20、40、80、160、320mg/L
4． AGES抗体 1瓶。
5． 125I –AGES 1瓶
测定方法：本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：
AGES RIA加液程序 （单位： ul ）
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I- AGES 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温放置15分钟后，3500 转/分 4℃离心20 min，弃上清液，测沉淀cpm数。
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值，或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。
注意事项：
本月标准品每瓶用 0.5 ml 缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 10 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 10.5ml ml缓冲液溶解
本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
本试剂盒主要技术指标：
1、 NSB：<5%。
2、 灵敏度：<10mg/l。
3、 标准曲线范围：0-400mg/L
4、 批内变异系数：CVw<7.2%；
批间变异系数：CVw < 10% 。
5、 正常参考值：各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
36.735±7.239 mg/L
本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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