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骨形态发生蛋白7放免试剂盒说明书
BMP-7（HY-10149） RIA KIT
骨形态发生蛋白- 7(Bone morphogenetic protein 7 BMP-7)又称为成骨蛋白-1(OP-1)属于转化生长因子-β(TGF-β)超家族。BMP-7是由431个氨基酸组成的糖蛋白，其信号肽和前结构域分别有29个和263个氨基酸，在Arg-292与Ser-293之间断裂后，释放出由139个氨基酸组成的成熟肽，体内以同二聚体的方式来完成其生物学功能。BMP-7作为其家族的一个成员，研究发现它也具有异位成骨作用’，随后发现其具有明显的肾脏保护作用。在肾脏发育过程中，BMP-7可以诱导输尿管芽的发生及肾小球的形成。此外,在肾脏疾病中BMP-7可以通过Smad通路拮抗转化生长因子β诱导的肾小管上皮细胞间充质转分化,而在肾脏纤维化、糖尿病肾病等肾脏疾病中发挥重要作用。
标本的收集：空腹抽静脉血2ml离心取血清，-20℃保存三个月。
该药盒主要应用范围：
* 糖尿病的研究；
* 肾病的研究；
* 骨折愈合、退行性骨关节炎的研究；
药盒组成：（常温运输，4℃保存）
1． BMP-7缓冲液1瓶
2． BMP-7（第二抗体）1瓶，用前充分摇匀。
3． BMP-7标准品5瓶，浓度为20、40、80、160、320 ng/mL
4． BMP-7抗体 1瓶。
5． 125I –BMP-7 1瓶
测定方法：本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：
BMP-7 RIA加液程序 （单位： ul ）
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I- BMP-7 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温放置15分钟后，3500 转/分 4℃离心20 min，弃上清液，测沉淀cpm数。
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值，或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。
注意事项：
本月标准品每瓶用 0.5 ml 缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 10.5 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 10.5 ml缓冲液溶解
本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
本试剂盒主要技术指标：
1、 NSB：<5%。
2、 灵敏度：<2 ng/ml。
3、 标准曲线范围：0-320ng/ml
4、 批内变异系数：CVw<7.3%；
批间变异系数：CVw < 10% 。
5、 正常参考值：47ng/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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