II型胶原蛋白放免说明书 COLII(HY-10092) RIA KIT II型原胶原蛋白(Collagen type II,COLII),在软骨基质中纤维成分以II型胶原蛋白纤维为主,II型胶原蛋白纤维的变化势必引起生物力学性能的改变。II胶原蛋白是胶原蛋白的一种形式。本试剂盒采用竞争放射免疫分析法,。即用待测样本中的COLLII和125I –COLII与有限量的COLII抗体在适宜条件下进行竞争性结合反应。
标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。
该药盒主要应用范围: * 肿瘤疾病的研究 * 免疫性疾病研究 药盒组成:(常温运输,4℃保存) 1. COLII缓冲液1瓶 2. COLII(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。 3. COLII标准品5瓶,浓度为1、2、4、8、16 ng/mL 4. COLII抗体 1瓶。 5. 125I –COLII 1瓶 测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作: COLII RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 200 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I- COLII 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放置24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。
结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。 注意事项: 本月标准品每瓶用 0.5 ml 缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 10.5 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 10.5 ml缓冲液溶解 本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻) 本试剂盒主要技术指标: 1、 NSB:<5%。 2、 灵敏度:<0.1ng/ml。 3、 标准曲线范围:1-16ng/ml 4、 批内变异系数:CVw<7.3%; 批间变异系数:CVw < 10% 。 5、 正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 3.87±2.12 ng/mL 本月药盒参考数据: ————————————————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 ————————————————————————————————————————— CPM ————————————————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % ————————————————————————————————————————— 地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业园东区1号楼12层12A 北京华英生物技术研究所 免费电话:8008109828 邮 编: 100085 电 话:(010)88114651 (010) 56146198 传 真:(010)88112680 网址:www.sinoukbio.com E-Mail:sinouk@163.com QQ客服:1749417768
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