Ⅰ型胶原氨基末端肽放免试剂盒说明书
PINP1(HY-077) RIA KIT
I型前胶原羧基末端肽 (cross-linked N-telopeptides of Type 1 collegen PINP1)是I型原胶原蛋白的代谢产物,检测代谢产物PINP1来反映I型胶原蛋白的含量。本试剂盒利用抗原抗体特异性结合的原理建立了PINP1的放射免疫分析检测方法。
标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。
该药盒主要应用范围:
* 肿瘤疾病的研究
* 免疫性疾病研究
药盒组成:(常温运输,4℃保存)
1. PINP1缓冲液1瓶
2. PINP1(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。
3. PINP1标准品7瓶,浓度为10、20、40、80、160ug/L
4. PINP1抗体 1瓶。
5. 125I –PINP1 1瓶
测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
PINP1 RIA加液程序 (单位: ul )
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I- PINP1 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项:
本月标准品每瓶用 0.5 ml 缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 10.5 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 10.5 ml缓冲液溶解
本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术指标:
1、 NSB:<5%。
2、 灵敏度:1ug/L。
3、 标准曲线范围:10-160ug/L
4、 批内变异系数:CVw<7.3%;
批间变异系数:CVw < 10% 。
5、 正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
35±8 ug/L
本月药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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