突触素SY放免药盒操作说明书 SY(HY-001) RIA KIT 突触素(Synaptophysin SY)由307个氨基酸组成,分子量为38kD,包括四个跨膜区,其氨基端和羧基都暴露在胞浆内。突触素在各种神经元的突触前囊泡中广泛存在。参与突触囊泡的导入、转运和神经递质的释放,参与突触囊泡再循环,参与突触发生。突触素是突触囊泡上的特异性蛋白质,与神经递质的释放直接相关,神经递质又是神经元实现功能的介质,因此突触素可作为突触的特异标记物之一,用来检测突触的密度和分布。突触素作为一种神经内分泌物标记物,还用于神经内分泌肿瘤的检测。
药盒组成:(常温运输,4℃保存) 1. SY A缓冲液1瓶 2. SY Α(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。 3. SY Α标准品7瓶,浓度为10、25、50、100、200、400pg/mL 4. SY Α抗体 1瓶。 5. 125I –SY Α 1瓶 测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作: SY A RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 200 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I- SY Α 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放置24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。
结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。 注意事项: 本月标准品每瓶用 0.5 ml 缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 10 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 10.5ml ml缓冲液溶解 本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻) 本试剂盒主要技术指标: 1、 NSB:<5%。 2、 灵敏度:<100pg/ml。 3、 标准曲线范围:0-4000pg/ml 4、 批内变异系数:CVw<7.1%; 批间变异系数:CVw < 10% 。 5、 正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 20-80pg/mL 本月药盒参考数据: ————————————————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 ————————————————————————————————————————— CPM ————————————————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % —————————————————————————————————————————
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